产品名称:伯克氏菌通用PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Burkholderia spp.PCR 编号:HE30765-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 CHRYSAROBIN(RG)(PLEASE CALL) 质量规格:>99%,BR,5合物 包装;5g CHONDROITIN BUFFER SOLUTION(RG) 质量规格:>95%,进口 包装;100g 硫酸软骨素A钠盐 CHONDROITIN SULFATE SODIUM SALT BOVINE(RG) 质量规格:>99%,进分 包装;25g 硫酸软骨素A钠盐 CHONDROITIN SULFATE SODIUM SALT BOVINE(RG) 质量规格:>98% 包装;100g (1S)-菊酸内酯 CHRYSANTHEMOLACTONE, (1S)-(RG) 质量规格:>98%,BR 包装;25g (1R)-野菊花醇丙酮 CHRYSANTHEMOLACTONE, (1R)-(RG) 质量规格:>98%,BR 包装;5g 氯化胆碱 CHOLINE CHLORIDE(RG) 质量规格:98%,美国进口 包装;100g 吡啶甲酸铬 CHROMIUM(III)PICOLINATE(SH) 质量规格:>98%,进分 包装;25g CHRYSANTHELLIN B(SH) 质量规格:>98%,进分 包装;5g CHRYSANTHELLIN A(SH) 质量规格:>90%,进口 包装;1g CHRYSANTHELLIN A(SH) 质量规格:>95%,进口 包装;5g 4-二氢色原酮 CHROMANONE, 4-(RG) 质量规格:>95%,进口 包装;25g 4-二氢色原酮 CHROMANONE, 4-(RG) 质量规格:>97% 包装;5g 4-二氢色原酮 CHROMANONE, 4-(RG) 质量规格:>98%,选择性的PI3K δ/γ抑制剂 包装;100g 6-硫酸软骨素钠盐 CHONDROITIN SULFATE SHARK CARTILAGE(RG)(PLEASE CALL) 质量规格:>98%,美国进口 包装;25g 吡啶甲酸铬 CHROMIUM(III)PICOLINATE(P) 质量规格:>97%,进分 包装;5g 吡啶甲酸铬 CHROMIUM(III)PICOLINATE(P) 质量规格:>99%,AR 包装;100mg 伯克氏菌通用PCR检测试剂盒说明书Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman 中文名称:茄病镰刀菌(不提供)种属:Haematonectria│haematococca (Berk. & Broome) Samuels & Rossman分离基物:喜树茎提供形式:斜面培养物模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98% Pseudocercospora│lilacis (Desm.) Deighton 中文名称:丁香假尾孢菌种属:Pseudocercospora│lilacis (Desm.) Deighton分离基物:丁香叶片提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98% Tolypocladium│cylindrosporum W. Gams 中文名称:弯颈霉属种属:Tolypocladium│cylindrosporum W. Gams分离基物:林区土壤提供形式:斜面培养物模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:98% Phytophthora│capsici Leonian 中文名称:辣椒疫霉种属:Phytophthora│capsici Leonian分离基物:辣椒茎提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:进行分析检测及抗病性鉴定,指导。培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99% Armillaria│ostoyae (Romagn.) Herink 中文名称:奥氏蜜环菌种属:Armillaria│ostoyae (Romagn.) Herink分离基物:杨树提供形式:斜面培养物模式菌株:no培养方法培养基:72生长条件:25存储条件:液氮超低温冻结法;定期移植法 纯度:99% Fomitopsis│pinicola (Sw.) P. Karst. 中文名称:红缘拟层孔菌种属:Fomitopsis│pinicola (Sw.) P. Karst.提供形式:斜面培养物模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25存储条件:定期移植法 纯度:99% Fusarium│oxysporum f.sp. cucumerinum J.H. Owen 中文名称:尖镰孢 黄瓜专化型种属:Fusarium│oxysporum f.sp. cucumerinum J.H. Owen分离基物:黄瓜叶片提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:26--30存储条件:定期移植法 纯度:97% Hericium erinaceus (Bull.) Pers. 中文名称:猴头菇种属:Hericium erinaceus (Bull.) Pers.分离基物:组织块提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:食用菌培养方法培养基:PDA 培养基::马铃薯提取液 1.0 L,葡萄糖 20.0 g,琼脂 15.0 g,自然pH生长条件:25-30℃,好氧存储条件:定期移植法 纯度:97% |