产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:伯氏立克次氏体柯克斯体PCR检测试剂盒 英文名称:Coxiella burnetii ()PCR 编号:HE30859-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 N-乙酰-L-肉碱盐酸盐/盐酸-3-O-乙酰左旋肉碱/O-乙酰基-L-肉碱盐酸盐/2-乙酰氧基-3-*铵基丁酸氯化物/盐酸乙酰基左卡尼汀/邻乙酰基左旋肉碱的氢氯化物/L-乙酰肉碱氯化物/ALC/ALCAR 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;500ml α-酮基缬氨酸钙盐/3-甲基-2-氧丁酸钙盐/3-甲基-2-氧代丁酸钙盐/酮缬氨酸钙/Calcium alpha-ketovaline 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯/9-芴甲基-N-琥珀酰亚氨基碳酸酯/N-(9氢-氟-2-甲氧基)琥珀酰胺/9-芴甲基-N-琥珀酰亚胺基碳酸酯/FMOC-OSU 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-偶氮苯丙三氮唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/双(二甲基氨基)甲叉-三唑[4,5-B]吡啶3-氧化物六氟磷酸盐/2-(7-偶氮苯并三氮唑)-四甲基脲六氟磷酸酯/O-(7-氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/HATU 质量规格:HPLC≥98%,BR 包装;1g CBZ-L-缬氨酸/N-苄氧羰基-L-缬氨酸/N-苄氧羰酰基-L-缬氨酸/N-CBZ-L-Valine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g D-异亮氨酸/D-异白氨酸/(2R,3R)-2-氨基-3-甲基戊酸/D-lsoleucine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;250mg β-丙氨酸乙酯盐酸盐/β-丙胺酸乙酯盐酸盐/氨基乙酸乙酯/β-Alanine ethyl ester HC1 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g L-丙氨酰胺盐酸盐/L-丙胺酰胺盐酸盐/L-Alaninamide hydrochloride 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;100ml D-天冬酰胺一物/D-天冬素/D-天门冬酰胺一合物/D-Asparagine Monohydrate 质量规格:TLC≥98%,标准品 包装;25ml D-谷氨酰胺/D-谷氨酸-5-酰胺/D-氨羰基丁氨酸/D-麸氨酰胺/D-Glutamine 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g D-焦谷氨酸/(R)-2-吡咯烷酮-5-羧酸/D-Pyroglutamic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;5g D-赖氨酸/D-Lysine 质量规格:HPLC≥99%,标准品 包装;25g L-脯氨酰胺/L-Prolinamide 质量规格:HPLC≥99%,标准品 包装;5g D-脯氨酰胺/D-Prolinamide 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;10g BOC-L-苯丙氨醇/(S)-(-)-2-叔丁氧羰基氨基-3-苯基-1-丙醇/N-Boc-L-苯丙氨醇/N-BOC-L-氨基丙醇/N-叔丁氧甲酰基-L-苯丙氨醇/N-(叔丁氧羰基)-L-苯丙氨醇/Boc-L-Phenylalaninol 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;2.5g BOC-L-丙氨醇/N-叔丁氧羰基-L-丙氨醇/Boc-L-alaninol 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g BOC-L-脯氨醇/N-叔丁氧羰基-L-脯氨醇/(S)-(-)-1-叔丁氧羰基-2-吡咯烷甲醇/N-Boc-L-脯氨酸醇/BOC-L-Prolinol 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;25g 伯氏立克次氏体柯克斯体PCR检测试剂盒Endomycopsis│fibuligera 中文名称:扣囊拟内孢霉=扣囊复膜孢酵母种属:Endomycopsis│fibuligera提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:13生长条件:25-28℃ 纯度:97% Colletotrichum│panacicola 中文名称:人参刺盘孢(人参炭疽病菌)种属:Colletotrichum│panacicola提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:24-25℃ 纯度:97% Gliocladium│roseum 中文名称:粉红粘帚霉种属:Gliocladium│roseum提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25-28℃ 纯度:99% Eurotium│herbariorum 中文名称:蜡叶散囊菌种属:Eurotium│herbariorum提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:25℃ 纯度:99% Bipolaris│sorokiniana 中文名称:麦根腐平脐蠕孢种属:Bipolaris│sorokiniana提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:18-22℃ 纯度:≥98% Cortinarius rufo-olivaceus 中文名称:紫红丝膜菌(斜面)种属:Cortinarius rufo-olivaceus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:综合PDA:马铃薯煮汁1000mL,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,葡萄糖 20g,维生素B1 10mg,琼脂 20g,pH自然。马铃薯煮液:200g马铃薯,去皮,切块,放入蒸馏中煮沸30min,取滤液定容至1000mL,备用。121℃,15min。生长条件:25℃,好氧存储条件:液氮超低温冻结法;矿物油法;定期移植法 纯度:≥98% Amphibacillus│sp. 中文名称:双芽胞杆菌种属:Amphibacillus│sp.分离基物:土壤提供形式:斜面培养物模式菌株:no应用领域:检测培养方法培养基:2生长条件:30-37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥98% Pseudomonas│oryzihabitans 中文名称:栖稻假单胞菌种属:Pseudomonas│oryzihabitans分离基物:土壤提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:可以在含1000mg/l的苄磺隆的无机盐培养基:中生长培养方法培养基:33生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;定期移植法 纯度:98% 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |