丙型肝炎病毒型PCR检测试剂盒说明书

服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建

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特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
毛蕊花糖苷/毛蕊花甙/麦角甾苷/类叶升麻苷/Verbascoside 包装;500g

表儿茶素没食子酸酯/表儿茶精没食子酸酯/(-)-表儿茶素没食子酸酯/表儿茶来没食子酸酯/ECG 包装;100mg

异绿原酸A/3,5-二咖啡酰奎宁酸/Isochlorogenic acid A 包装;1g

异绿原酸B /3,4-二咖啡酰奎宁酸/Isochlorogenic acid B 包装;250mg

二异丙基偶氮羟酸盐/偶氮二甲酸二异丙酯/偶氮二羧酸异丙酯/偶氮二羧酸二异丙酯/偶氮二异丙基二羧酸/偶氮二甲酸二异丙基酯/DIAD 包装;1g

1,8-二氮杂-9-芴酮/1,8-二氮杂芴-9-酮/1,8-二氮-9-芴酮/DFO 包装;25g

二聚对二甲苯/对二甲苯二聚体/对环芳烷/三环[8.2.2.24,7]十六碳-1(12),4,6,10,13,15-六烯/[2,2]二聚对二甲苯/[2.2]对环芳烷/对二甲苯环二体/PCF 包装;5g

15-冠-5/冠醚/15-冠醚-5/15-冠-5醚/1,4,7,10,13-五氧环十五烷/15-Crown-5 包装;10ml

12-冠醚-4/1,4,7,10-四氧(杂)环十二烷/1,4,7,10-四氧环十二烷/12-冠-4/12-冠4-醚/12-Crown-4 包装;50ml

二苯并-18-冠醚-6/苯并-18-冠(醚)-6/二苯基十八冠六聚/二苯并十八冠六聚/二苯-18-框-6/二苯并-18-冠醚-6/Dibenzo-18-crown-6 包装;1g

苯并-18-冠醚-6/2,3,5,6,8,9,11,12,14,15-十氢-1,4,7,10,13,16-苯并六氧(杂)环十八烯/苯并-18-冠-6-醚/苯并-18-冠-6/Benzo-18-crown-6 包装;25g

偶氮二甲酸二苄酯/偶氮二羟酸二苄酯/Dibenzyl azodicarboxylate 包装;5g

丹参素/β-（3，4-二羟基苯基）乳酸/丹参酸甲/Danshensu 包装;100mg

1,3-丙烷磺内酯/1,2-氧杂硫代羟烷-2,2-二氧化物/1,3-丙磺酸内酯/1,3-丙基磺酸内酯/1,3-丙磺内酯/丙磺酸内酯/1,3-丙烷磺酸内酯/1,3-Propanesultone 包装;50mg

1,3-二甲基咪唑啉酮/1,3-二甲基-2-咪唑啉酮/1,3-二甲基-2-咪唑烷酮/N,N’-二甲基亚乙基脲/1,3-二甲基-2-咪唑酮/1,3-二甲咪唑啉酮/DMI/DMEU 包装;1g

4-氟苯基醋酸酯/4-氟苯基乙酸酯/乙酸(4-氟)苯酯/乙酸-4-氟苯基酯/对氟苯基醋酸酯/醋酸4-氟苯基酯/4-Fluorophenyl acetate 包装;5g

四乙二醇二对甲苯磺酸酯/四甘醇双(对甲苯盐酸盐)/四乙二醇双(对甲苯磺酸酯)/Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate 包装;1g
丙型肝炎病毒型PCR检测试剂盒说明书Aspergillus phoenicis 中文名称：海枣曲霉种属:Aspergillus phoenicis提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:Type strain of A. saitoi培养方法培养基:综合PDA：20%马铃薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，琼脂 15g，pH 自然。生长条件:25-28℃，好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：97%

Cephalosporium│sp. 中文名称：头孢霉种属:Cephalosporium│sp.分离基物:冬虫夏草提供形式:斜面培养物；冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:14生长条件:15℃存储条件:真空冷冻干燥法；定期移植法 纯度：97%

Gluconacetobacter xylinum 中文名称：木醋杆菌种属:Gluconacetobacter xylinum提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:Type strain；细菌纤维素培养方法培养基:醋酸菌培养基:葡萄糖100.0g ，酵母提取物 10.0 g ，CaCO3 20.0 g ，琼脂15.0 g ，蒸馏，1.0 L ，pH 6.8生长条件:30℃，好氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：99%

Pediococcus pentosaceus 中文名称：戊糖片球菌种属:Pediococcus pentosaceus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:MRS生长条件:37℃，兼性厌氧存储条件:液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法 纯度：99%

Cystobacter│violaceus 中文名称：紫色孢囊杆菌种属:Cystobacter│violaceus提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:作为粘细菌聚酮合酶的的基因筛选库，分析和筛选聚酮基因的多样性培养方法培养基:844生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度：98%

Nannocystis│exedens 中文名称：侵蚀侏儒囊菌种属:Nannocystis│exedens提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:作为粘细菌聚酮合酶的的基因筛选库，分析和筛选聚酮基因的多样性培养方法培养基:844生长条件:30℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度：98%

Myxococcus│stipitatus 中文名称：叶柄粘球菌种属:Myxococcus│stipitatus分离基物:兔粪粒提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:粘细菌分类及菌库构建培养方法培养基:844生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法 纯度：AR,80%

Myxococcus│fulvus 中文名称：橙色粘球菌种属:Myxococcus│fulvus分离基物:杨树皮提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:粘细菌分类及药物筛选培养方法培养基:847生长条件:30℃存储条件:液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法 纯度：AR,80%