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克氏食道线虫探针法荧光PCR检测试剂盒

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更新日期:
2020-12-01
点击次数:
120
产品特点:
克氏食道线虫探针法荧光PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
  50次克氏食道线虫探针法荧光PCR检测试剂盒的详细资料:

荧光定量PCR试剂盒制造技术:
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒,包括盒体,盒体由上盒体和下盒体组成,上盒体的底面上设有限位凸起,下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽,且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖,侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾,下盒体的上端边缘处设有环形凸起,两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上;凹槽的内部设有固定杆,固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架;下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分,并将两个部分通过侧盖连接,即可保证试剂盒的便携性,同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

 产品名称

克氏食道线虫探针法荧光PCR检测试剂盒

 英文名称

 Oesophagostomum clumbianum

 货号

 YSP97020

样品RNA的抽提:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
端锚聚合酶1(TNKS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 米曲霉 5g

端锚聚合酶2(TNKS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 链格孢 25g

肌纤蛋白(MYOC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 近平滑假丝酵母 5g

肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 酿酒酵母 1g

叉头框蛋白A2(FOXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 生孢梭菌 250mg

回肠脂肪酸结合蛋白(FABP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 疣孢青霉 5g

白细胞关联免疫球蛋白样受体2(LAIR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 泛酸枝芽孢杆菌 1g

核仁素(NCL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 厦门脱硫杆状菌 250mg

染色框同源物3(CBX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 水生拉恩氏菌 1g

Cathelicidin抗菌肽(CAMP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 日本曲霉 25ml

核仁酸蛋白(NPM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 97% 冻土毛霉冻土变型 25ml

2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 95% 木生条孢牛肝菌 100mg

神经纤维网蛋白1(NRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 95% 短短芽孢杆菌 25mg

戊糖素(PTD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 99.9% metals basis 枯草芽孢杆菌 100g

血管抑素(ANG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 99.9% metals basis 灰略红链霉菌 25g

密封蛋白(OCLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98%(GC) *匍枝根霉或黑根霉 1g

封闭蛋白1(CLDN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 98% 孤岛杆菌 1g

周期素依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 96% 冷温木拉克酵母 1g
克氏食道线虫探针法荧光PCR检测试剂盒β连环蛋白样蛋白1抗体CEA/Biotin  生物素化鼠抗癌胚抗原单克隆抗体(检测)IgG100 ul

阳离子转运调控样蛋白1抗体GST-Tag/Biotin  生物素标记兔抗重组谷胱甘肽转移酶GST标签蛋白抗体IgG1 Kit

DNA断裂因子相似蛋白A抗体CD167a(DDR1)/HRP  辣根过氧化物酶标记CD167a抗体IgG100 ul

DNA断裂因子相似蛋白B抗体 Alpha -HCG/Gold  胶体金离子α 亚基绒毛膜促性腺激素单抗 IgG100 ul

顺氨铂耐药相关蛋白9抗体 Beta-HCG/Gold  胶体金离子标记抗β亚基绒毛膜促性腺激素单抗IgG20 ul

22号染色体开放阅读框40抗体PSA /Gold  胶体金离子标记抗鼠抗前列腺特异性抗原单克隆抗体(检测)IgG100 ul

嗜酸粒细胞趋化蛋白3抗体TRF/Gold  金离子标记抗转铁蛋白抗体IgG100 ul

21号染色体开放阅读框33抗体CD8/PE  荧光素藻红蛋白标记兔抗、大、CD8抗体IgG400 ul

细胞角蛋白15抗体VWF/PE  荧光素PE标记血管性血友病因子抗体IgG400 ul

 

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