产品名称:茄病镰刀菌PCR检测试剂盒说明书 英文名称:Fusarium solaniPCR 编号:HE31013-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 钴粉/钴/Cobalt 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) 包装;100g 硝酸钴/硝酸亚钴/硝酸钴/硝酸钴(II)/Cobaltous nitrate hexahydrate 质量规格:分析标准品 包装;25g 硫酸钴/硫酸亚钴/七硫酸钴/赤矾/硫酸钴(II)七合物/Cobalt sulfate heptahydrate 质量规格:分析标准品 包装;5g 无硫酸钴/无硫酸亚钴/Cobaltous sulfate 质量规格:分析标准品,>99.5%(GC) 包装;1g 碳酸钴/碱式碳酸钴/碳酸亚钴/碳酸钴(II)/Coblltous carbonate 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC) 包装;5g 四氧化三钴/氧化钴/一氧化钴合三氧化二钴/四氧化三钴(II,III)/Cobalt(II,III) oxide 质量规格:分析标准品,≥99.8%(GC) 包装;100g 三氧化二钴/氧化高钴/黑色氧化钴/氧化钴(Ⅲ)/Cobalt(III) oxide 质量规格:分析标准品,≥99.5% (GC) 包装;25g 乙酸钴/乙酸亚钴/醋酸亚钴/醋酸钴/四合乙酸钴/乙酸钴(II)四合物/Cobaltous acetate tetrahydrate 质量规格:分析标准品,≥99.8%(GC) 包装;5g 草酸钴/乙二酸亚钴/草酸亚钴/Cobaltous oxalate dihydrate 质量规格:分析标准品,>99.5%(GC) 包装;1g 羟基脲/羟基尿素/氨基甲酰基羟胺/氨甲酰羟基胺/N-羟基脲/Hydroxyurea 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 包装;25g 硫脲/硫代尿素/异硫脲/硫尿素/硫代碳酰二胺/Thiourea 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 包装;5g 四氧嘧啶/阿脲一合物/中草酸二酰脲/二酰脲/1,3-二氮四羰六环/2-氧代丙二酰脲/二氮-(1,3)六环四酮/1,3-二氮六环四酮/Alloxan monohydrate 质量规格:Standard for GC,≥99%(GC) 包装;1g 缩二脲/氨缩脲/氨基甲酰脲/亚氨基二碳酸二酰胺/双缩脲/二缩脲/Biuret 质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC) 包装;5g 烯丙基硫脲/丙基硫脲/1-烯丙基-2-硫脲/N-烯丙基硫脲/硫代芥子油/硫代芥子胺/基硫脲/基脲/阿利硫脲/Allyl thiourea 质量规格:standard for GC,≥99%(GC) 包装;1g 盐酸-S-苄基异硫脲/苄基异硫脲盐酸盐/磺酸试剂/S-苄基异硫脲盐酸盐/S-苄基氯化异硫脲/ S-苄基硫脲盐酸盐/S-Benzylthiuronium chloride 质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC) 包装;5g 对称二苯硫脲/N,N-二苯基硫脲/S-二苯基硫脲/二苯硫脲/N,N'-对称二苯基硫脲/二苯基硫脲/均二苯硫脲/促进剂CA/二基甲硫酮/硫化促进剂DPTU/硫代对称二苯脲/Thiocarbanilide 质量规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC) 包装;25g 2-萘基硫脲/β-萘硫脲/2-Naphthylthiourea 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 包装;5g 茄病镰刀菌PCR检测试剂盒说明书Idiomarina│insulisalsae 中文名称:盐岛海源菌种属:Idiomarina│insulisalsae分离基物:土样/盐场土样提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% Cohaesibacter│gelatinilyticus 中文名称:解明胶粘聚杆菌种属:Cohaesibacter│gelatinilyticus分离基物:样/海提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Serinicoccus│sp. 中文名称:丝氨酸球菌种属:Serinicoccus│sp.分离基物:沉积物/重力活塞上层取样提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98% Agromyces│indicus 中文名称:农霉菌(加词待译)种属:Agromyces│indicus分离基物:沉积物/多管样品提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:≥98% Microbacterium│lindanitolerans 中文名称:耐林丹微杆菌种属:Microbacterium│lindanitolerans分离基物:沉积物/重力活塞取样提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99.9% metals basis Brachybacterium│faecium 中文名称:粪小短杆菌种属:Brachybacterium│faecium分离基物:其他/家禽褥草(poultry deep litter )提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:221生长条件:28-30℃存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99.9% metals basis Nesterenkonia│halobia 中文名称:喜盐涅斯特连科氏菌种属:Nesterenkonia│halobia分离基物:其他/未精炼的(unrefined)日晒盐提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:模式菌株:培养方法培养基:221生长条件:28-30存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99.9% metals basis Janibacter│sp. 中文名称:两面神菌种属:Janibacter│sp.分离基物:沉积物/TVG沉积物提供形式:冻干物模式菌株:no应用领域:海洋放线菌培养方法培养基:471生长条件:28℃-30&存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:99% |