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石膏样小孢子菌探针法荧光PCR检测试剂盒

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更新日期:
2020-12-01
点击次数:
117
产品特点:
石膏样小孢子菌探针法荧光PCR检测试剂盒注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
  50次石膏样小孢子菌探针法荧光PCR检测试剂盒的详细资料:

客户只需提供样品和待检测基因名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。

 产品名称

石膏样小孢子菌探针法荧光PCR检测试剂盒

 英文名称

 Microsporum gypseum

 货号

 YSP96918

荧光定量PCR试剂盒制造技术:
产品仅用于科研本实用新型技术公开了一种实时荧光定量PCR试剂盒,包括盒体,盒体由上盒体和下盒体组成,上盒体的底面上设有限位凸起,下盒体的顶面上设有与限位凸起匹配的凹槽,且在下盒体左右侧壁的下端均软连接有侧盖,侧盖远离下盒体的一端连接有卡勾,下盒体的上端边缘处设有环形凸起,两个卡勾分别勾住环形凸起的左右两端将上盒体固定在下盒体上;凹槽的内部设有固定杆,固定杆上通过转动件转动连接有用于放置试管的试管架;下盒体的左右两侧均设置有收纳槽。本实用新型技术通过将盒体分为上下组合的两个部分,并将两个部分通过侧盖连接,即可保证试剂盒的便携性,同时使用试剂盒自带的试管可提高检测的效率。
样品RNA的抽提:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1)紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 g RNA/ml。样品RNA浓度(g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 g/ml。
phospho-APC (Ser2054) 英文名称: 酸化腺瘤样息肉抗体 0.1ml

抗K3蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Human Fibrinogen like peptide 2,fgl2 ELISA Kit 人纤维介素蛋白Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗体(中华眼镜蛇)Multi-class antibodies规格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgM/Cy3 Cy3标记的羊抗小鼠IgM 规格 0.1ml

AFP-L3(Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3) ELISA Kit 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3 96T

NECAB1 英文名称: 神经元钙结合相关蛋白EFCBP1抗体 0.2ml

BRCA1 英文名称: 癌易感基因1抗体 0.1ml

Anti-Rho C RhoC抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml

ENA-Ab(Human anti-extractable nuclear antigen antibody) ELISA Kit 人抗可提取核抗原抗体Multi-class antibodies规格: 48T

Anti-IL-1 Alpha 白介素1α抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh Lrp2/Megalin 糖蛋白gp330抗体 规格 0.2ml

17-KS(Human 17-ketosteroids) ELISA Kit 人17-酮类固醇 96T

phospho-c-Raf(Tyr341) 英文名称: 酸化原癌基因c-Raf抗体 0.1ml

EVA肉汤250克EVA Broth用于链球菌的增菌培养

赖氨酸吲哚动力培养基250克LIM Medium用于链球菌的分离培养;细菌的赖氨酸、吲哚和动力复合生化试验

BETA-SSA琼脂250克BETA-SSA Agar链球菌的选择性分离培养

胰酪胨大豆羊血琼脂基础250克Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base蜡样芽孢杆菌的溶血测试验

改良V-P培养基250克V-P Medium Modified蜡样芽孢杆菌的溶血试验

R2A琼脂250克R-2A Agar饮用水中导生细菌分离培养
石膏样小孢子菌探针法荧光PCR检测试剂盒血小板活化因子CTR9抗体OAT-1/FITC  荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗)抗体IgG100 ul

前列环素合成酶抗体OAT-1/FITC  荧光素标记阴离子转运蛋白-1(抗大、)抗体IgG100 ul

软骨寡聚基质蛋白抗体OAT-3/FITC  荧光素标记阴离子转运蛋白-3抗体IgG100 ul

T淋巴细胞CD1A抗体OAT4L/URAT1 /FITC  荧光素标记尿酸盐重吸收转运子1抗体IgG100 ul

酸化周期素B1抗体obestatin/Ghrelin/GHRP /FITC  荧光素标记肥胖抑制素抗体IgG500 ul

胞浆型脂酶A2抗体OCLN(Occluding)/FITC  荧光素标记咬合蛋白抗体IgG100 ul

胆固酯转移蛋白抗体ODC/FITC  荧光素标记抗鸟氨酸脱羧酶抗体IgG100 ul

紧密连接蛋白6抗体OCT1 /FITC  荧光素标记阳离子转运器1抗体IgG20 ul

酸化紧密连接蛋白6抗体OCT2 /FITC  荧光素标记阳离子转运蛋白2抗体IgG100 ul
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μ
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.产品仅用于科研所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。

 

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