施氏油脂线虫PCR检测试剂盒说明书

特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
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服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
虎红/玫瑰红/四氯四荧光素/孟加拉红/孟加拉玫瑰红B/酸性红94/Rose Bengal 质量规格：含量测定 包装;5g

虎红钠盐/四氯四荧光素二钠/孟加拉玫瑰红B钠盐/Rose Bengal Na salt 质量规格：含量测定 包装;100g

天狼星红BB/天狼星玫红BB/ 5,5’-[羟基双[亚氨(2-磺基-4,1-亚苯基)偶氮]]双(6-氨基-4-羟基)-2-萘磺酸四钠/直接红2B/直接红75/氯唑耐晒桃红/天狼猩红BB/Sirius Rose BB 质量规格：含量测定 包装;25g

曙红B/伊红B/蓝光曙红/二溴二硝基荧光素二钠/4',5'-二溴-3',6'-二羟 基-2',7'-二硝基螺(异苯并呋喃-1(3H),9'-(9H)占吨)-3-酮二钠盐/酸性红91/Eosin B 质量规格：HPLC>97%,标准品 包装;5g

曙红Y(溶)/伊红Y(溶) /溶伊红/朝红/四溴荧光素二钠/曙红钠盐/四溴荧光黄/曙红变性次甲蓝/黄光曙红/曙红微黄/酸性红87/2',4',5',7'-四溴-3',6'-二羟基螺[异苯丙呋喃-1(3H),9'(9H)-占吨]-3-酮二钠盐/Eosin Y sodium salt water soluble 质量规格：>97%,BR,可用于细胞培养 包装;1g

曙红Y(醇溶)/伊红Y(醇溶) /四溴荧光素/醇溶伊红/酸性红87/溶剂红43/曙红Y(自由酸)/伊红Y(自由酸)/ 2',4',5',7'-四溴-3',6'-二羟基螺[异苯丙呋喃-1(3H),9'(9H)-占吨]-3-酮/Eosin Y free acid alcohol soluble 质量规格：供检查用 包装;5g

油红O/1-［2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮］-2萘酚/苏丹红5B/溶剂红27/红油O/1-[[4-[(二甲基苯基)偶氮]二甲基苯基]偶氮]-2-萘酚/Oil red O 质量规格：>99% 包装;1g

丽春红S/猩红S/酸性红112/3-羟基-4-[2-磺酸基-4-(4-磺酸苯基偶氮)苯基偶氮]-2,7-萘二磺酸四钠盐/Ponceau S 质量规格：>99%,标准品 包装;5g

丽春红2R/红R/红2R/丽春红G/酸性猩红/酸性大红/二甲丽春红/丽春红C/4-[(2,4-二甲苯基)偶氮]-3-羟基-2,7-萘二磺酸二钠盐/酸性红26/苯偶氮-8-乙酰基-1-萘酚-3,6-二磺酸钠盐/酸性偶氮红/Ponceau 2R 质量规格：含量测定 包装;1g

异硫氰酸玫瑰红B/异硫氰酸罗丹明B/罗丹明B异硫氰酸酯/若丹明B异硫氰酸酯/异硫氰酸若丹明B/RBITC 质量规格：含量测定 包装;1mg

亚甲基蓝/次甲基兰/美蓝/美兰/亚甲蓝/品蓝/亚甲基兰/碱性蓝9/四甲基蓝/次甲基蓝/亚甲兰/碱性湖蓝BB/碱性亚甲天蓝/盐基湖蓝/盐基湖蓝BB/亚甲基天蓝/3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪-5-翁氯化物/次甲基蓝三/次甲蓝/甲稀蓝/氯化-3,7-双(二基)吩噻咛-5-鎓/Methylene Blue trihydratee 质量规格：含量测定 包装;10g

四溴酚兰/四溴酚蓝/四溴苯酚兰/TBPB 质量规格：>98%,标准品 包装;100g

伊文斯蓝/伊文斯兰/伊文思兰/偶氮蓝/依文氏兰/依文思蓝/依文斯兰/埃文斯蓝/6,6'-[[3,3'-二甲基(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]双(偶氮基)]双(4-氨基-5-羟基-1,3-萘二磺酸)四钠盐/4,4’双[7-(1-氨基-8-羟基-2,4-二磺基)萘-偶氮]-3,3’-联甲苯上钠盐/伊文思蓝/埃文蓝/偶氮兰/Evans blue 质量规格：含量测定 包装;25g

硝基氯化四氮唑蓝/硝基四唑紫/2-(对苯基)-3-(对基)-5-苯基四唑氯合物/2-(4-苯基)-3-(4-基)-5-苯基氯化四唑氯合物/硝基四氮唑紫/硝基四唑/硝基紫四唑/硝基氯化四氮唑/氯化-2-(4-磺苯)-3-(4-)-5-苯基-2H-四氮唑/2-(对代苯)-3-(对)-5-苯基氯化四氮唑/INT 质量规格：供检查用 包装;500g

氯化硝基四氮唑蓝/氮蓝四唑/硝基蓝四氮唑/硝基BT/氯化硝基四氮唑兰/硝基氯化四氮唑蓝/氮四唑蓝/氯化四唑氮蓝/NBT 质量规格：含量测定 包装;5g

靛蓝/还原靛蓝/印地科/靛青粉/靛兰(1)/还原蓝1#/靛/纯靛/铣傻謇叮合成靛青/2,2′-双氮茚型靛/Indigo 质量规格：含量测定 包装;1g

靛蓝胭脂红/5,5′-靛蓝二磺酸二钠盐/靛红/酸性靛蓝/可溶靛/靛卡红/靛兰二磺酸钠/酸性蓝74/食品蓝1/靛胭脂/靛蓝洋红/靛蓝胭脂红二钠盐/腚兰胭脂红/食用靛蓝/靛深红/靛蓝-5,5'-二磺酸钠盐/2(1,3-二氢-3-氧代-5-磺基-2H-吲哚-2-亚基)-2,3-二氢-3-氧代-1H-吲哚-5-磺酸二钠盐/靛蓝二磺酸钠/食用色素蓝2号/Indigo carmine 质量规格：含量测定 包装;5g
施氏油脂线虫PCR检测试剂盒说明书Enterobacter│sakazakii 中文名称：坂崎肠杆菌种属:Enterobacter│sakazakii提供形式:其他安全等级:3模式菌株:no培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法 纯度：99%

Salmonella│madelia 中文名称：马德利亚沙门氏菌种属:Salmonella│madelia提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:(1),6,14,25　y　1,7培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：99%

Salmonella│reading 中文名称：雷丁沙门氏菌种属:Salmonella│reading提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:4,12　e,h　1,5培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：99%

Salmonella│oranienburg 中文名称：奥拉宁堡沙门氏菌种属:Salmonella│oranienburg提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:6,7　m,t　-培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：98%

Salmonella│sendai 中文名称：仙台沙门氏菌种属:Salmonella│sendai提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:1,9,12　a　1,5培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：98%

Salmonella│bukavu 中文名称：布卡武沙门氏菌种属:Salmonella│bukavu提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:1,40　l,z28　1,5培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：≥98%

Salmonella│aesch 中文名称：艾斯奇沙门氏菌种属:Salmonella│aesch提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:6,8　z60　1,2培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：≥98%

Salmonella│minnesota 中文名称：明尼苏达沙门氏菌种属:Salmonella│minnesota提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:21　-　-,z33培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：98%