产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:脑膜蠕虫PCR检测试剂盒规格 英文名称:Parelaphostrongylus teniusPCR 编号:HE31352-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。
储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 膜封闭液 100ml 英文名称 Western Blocking Buffer储存条件 2-8℃,有效期1个月产品简介: Western Blot 膜封闭液(Blocking Buffer)适用于 Western Blot 实验中 PVDF 膜或 NC 膜等转印膜的封闭。封 闭后,可以减小后续的一抗或二抗和膜的非特异性结合,降低背景,增强信噪比,以达到理想的显色效果。 按照每张膜封闭需要 5-10 毫升封闭液计算,一个包装的 Western 封闭液可以封闭 10-20 张膜。 使用方法: 本产品为即用型,无需稀释。蛋白转膜后将转印膜置于容器中,加入足够量的膜封闭液充分覆盖膜,室 温下振荡封闭半小时至 1 小时,即完成膜的封闭,然后进行一抗孵育等后续操作。 蓝色预染次高分子量蛋白质Marker(43-200kDa) 10T 英文名称 Prestained Protein Marker(43kD-200kD)储存条件 -20℃,有效期1年。避免反复冻融,建议分装后于-20℃保存产品简介:本产品包含5种预染的已知分子量标准蛋白质,分子量范围为43kD-200kD,条带分别为:43,66.2,97.4,130,200。可以直接观察蛋白质电泳及清晰地判断Western Blot的转移效果。经SDS-PAGE凝胶电泳后转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的5条蓝色的蛋。 使用说明: 1.开封后,可根据需要分装成小管,建议每管分装10μl,-20℃贮存,每次取一管使用。 2.本产品已经含有了上样缓冲液,使用前取分装后的小管65℃预热5分钟即可上样进行电泳,上样量5-10μl。 3.建议分离胶浓度为8%。 彩虹130广谱蛋白marker(15-130KD) 20T(100ul) 别名 预染彩虹蛋白marker英文名称 ColorMixed Protein Marker(15-130KD)储存条件 -20℃,有效期2年单位 支彩虹130广谱蛋白marker说明书 货号: PR1950 规格: 20T (100μL)/50T(250μL) /100T(250μL×2) /500T(250μL×10) 保存: -20℃保存,有效期至少2年。 产品特点: l 三色预染,颜色鲜亮,条带整齐,便于观察。 l 用量少,节约成本,仅5ul即可完美呈现(1.5mm,10孔梳)。 l 广谱多带,一支即可满足多种实验需求。 产品简介: 本产品包含9种彩色预染的已知分子量标准蛋白,分子量范围为15kD-130kD,每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的9条彩色蛋白条带,其中70kD条带为红色,25kD条带为绿色,其余条带为蓝色。 荧光蛋白上样缓冲液 100ul 别名 立显蛋白电泳条带显色剂 蛋白荧光buffer 荧光上样缓冲液英文名称 Band-Now Pre-Staining Protein Sample Treatment Buffer for SDS-PAGE储存条件 -20℃荧光蛋白上样缓冲液在电泳前的样品处理阶段对SDS-PAGE的蛋白样品进行预染,标记上荧光。实验完成以后,凝胶中或转膜后的蛋白条可直接通过紫外灯、LED灯或其他数字成像系统进行观察和分析,无需染色脱色。 荧光蛋白上样缓冲液灵敏度高比银染高。稳定性强,背景低。可对所有蛋白进行染色,不影响蛋白的迁移率与电泳图谱。电泳过程中,游离的染料分子与溴酚蓝的迁移速率一致,跑胶结束时 移至凝胶末端,背景干净。荧光蛋白上样缓冲液非常适合用于追踪蛋白表达纯化以及Western blot的SDS-PAGE。 使用步骤 1 请在使用前根据管壁标签上的体积加入resuspension buffer重悬。Resuspension buffer在4℃可能会有沉淀产生,室温下放置至沉淀消失。2 将用上样缓冲液处理的蛋白样品与待电泳蛋白样品1:2混合。比如,3ul 上样缓冲液 + 6ul 蛋白样品。3 90-100℃加热上述处理的样品混合液5分钟。细胞或组织样品,加热时间延长至10分钟。确保加热温度>90℃使样品充分受热。Ÿ 大部分预制胶(Bis-Tris体系除外)可以直接进行下一步。Bis-Tris体系的预制胶(如Life Technology),需加入20%已处理样品体积的Enhancing buffer。比如,10ul已处理的样品需加入2ul Enhancing buffer。4 样品可以上样进行电泳了(无需再加Loading Buffer处理)。5 电泳结束后,将凝胶放至透射仪上进行观察和拍照。透射仪可以是紫外灯,蓝光LED灯或其它凝胶成像系统。如果光源在可见光波长范畴的无需剥胶,因为可见波长范围内的光可以穿透玻璃或塑料材质的胶板。6 (可选的)如果有需要,经荧光蛋白上样缓冲液处理的凝胶仍可进行考染。按标准的考染步骤进行即可。 低分子量LMW Calibration Kit(14.4-97.4KDa) 575ug 储存条件 2-8℃产品用途:蛋白质电泳Marker 脑膜蠕虫PCR检测试剂盒规格 磷化腺苷单磷活化蛋白激酶α2抗体Norglaucine hydrochloride别名: 分子式: C20H24ClNO4性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 阿朴啡生物碱;植物提取物;天然产物;天然产物库 性神经酰酶1抗体Glycosolone别名: 分子式: C16H19NO3性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 山小橘;喹啉酮;植物提取物;天然产物;天然产物库 粘附调节分子1抗体Methyl L-pyroglutama别名: 分子式: C6H9NO3性状: Oil纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 吡咯生物碱;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 气味结合蛋白抗体10-Hydroxyneoline别名: 分子式: C24H39NO7性状: Powder纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 乌头属;乌头生物碱;植物提取物;天然产物;天然产物库 乙醛脱氢酶2抗体Carmichaenine C别名: 分子式: C30H41NO7性状: Powder纯度: 97.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库 膜粘连蛋白10抗体2-Ethyl-2,6,6-trimethylpiperidin-4-one别名: 分子式: C10H19NO性状: Oil纯度: 特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库 前梯度同源蛋白2抗体Songorine别名: 分子式: C22H31NO3性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: GABA受体拮抗剂;乌头属;乌头生物碱;中药对照品;中药标准品;植物提取物;天然产物;天然产物库 乙醛脱氢酶5抗体Carmichaenine E别名: 分子式: C31H43NO8性状: Powder纯度: 97.5%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: 植物提取物;天然产物;天然产物库 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |