马立克氏病病毒PCR检测试剂盒说明书

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

​

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
非洲防己碱英文名称 Tubeimoside C分 子 量： 1365.46CAS NO.： 115810-13-4纯 度： ≥98%分子式： C64H100O31性状:规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性:提取来源:药理药效:鉴别方法: NMR；Ms检测方法:贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项:

粉防己碱英文名称 Teicoplanin分 子 量： 1709.39CAS NO.： 61036-62-2纯 度： ≥98%分子式： C78H77Cl2N8O32R性状:规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性:提取来源:药理药效:鉴别方法: NMR；Ms检测方法:贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项:

风信子素英文名称 Tenacissoside X分 子 量： 1261.4CAS NO.： 875057-87-7纯 度： ≥98%分子式： C61H96O27性状: 白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 通关藤药理药效:鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项:

缝籽嗪甲醚英文名称 Deoxyarbutin分 子 量： 194.23CAS NO.： 53936-56-4纯 度： ≥98%分子式： C11H14O3性状: 白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 86-87℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 补充中药理药效: 抗氧化，美白亮肤鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中

凤仙萜四醇苷A英文名称 Santalol分 子 量： 220.35CAS NO.： 11031-45-1纯 度： ≥98%分子式： C15H24O性状: 无色至微黄色稠厚液体规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 由檀香木油分馏得α和β的异构体混合物。通常是甲、乙位的混合物,以樟脑为原料合成而得药理药效: 檀香醇具有抗菌、利尿的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:乙腈：0.1%冰醋酸水＝55：45  λ：280nm(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项:

凤仙萜四醇苷B英文名称 Rutaecarpine分 子 量： 287.32CAS NO.： 84-26-4纯 度： ≥98%分子式： C18H13N3O性状: 白色结晶粉末规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 259-260℃溶解性: 溶于乙醇、、石油醚、苯，几乎不溶于水提取来源: 吴茱萸药理药效: 吴茱萸次碱具有镇痛、降血压及体温上升、扩张血管、保护心脏的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC-RP:正丁醇-0.6%正辛烷-1.0%甲酸-1.2%乙腈-88.2%水   λ：254nm (仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中

凤仙萜四醇苷C英文名称 Schisandrin C分 子 量： 384.42CAS NO.： 61301-33-5纯 度： ≥98%分子式： C22H24O6性状: 无色晶体规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 122～123℃溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 五味子药理药效: 五味子丙素具有拮抗 、抗癌、抗溃疡、保肝的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:甲醇：水（65:35）  λ：250nm(仅供参考）贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中

凤仙萜四醇苷K英文名称 Schisandrol B分 子 量： 416.46CAS NO.： 58546-54-6纯 度： ≥98%分子式： C23H28O7性状: 无色晶体规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点: 97～99℃溶解性: 可以、乙酸乙酯、DMSO等溶剂，不溶于水提取来源: 五味子药理药效: 五味子醇乙具有抗癌、抗病毒、保肝的作用鉴别方法: NMR；Ms检测方法: RP-HPLC:甲醇-水梯度洗脱  λ：254nm(仅供参考）或：甲醇：水溶液=70:30 波长：250nm贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项: 补充中

佛手酚英文名称 Vitamin K分 子 量： 450.7CAS NO.： 12001-79-5纯 度： ≥98%分子式： C31H46O2性状: 黄色至橙色透明黏稠液体，无臭规格: 20mg/50mg/1g，可按客户需求包装！用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等熔点:溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有机溶剂；提取来源: 苜蓿药理药效:鉴别方法: NMR；Ms检测方法: HPLC贮存条件: 低温冷藏，避光，密封，干燥注意事项:
马立克氏病病毒PCR检测试剂盒说明书泊洛沙姆188有效期: 2年溶解性: 100mg/ml in Water别名: 聚醚英文名称: Polyethylene-polypropylene glycol188

k-卡拉胶有效期: 3年级别: BR溶解性: 10mg/mL in water别名: 卡拉胶类型III Κ-角叉菜聚糖 角叉莱胶

丹磺酰氯有效期: 3年溶解性: 20mg/ml CHCL3别名: 丹磺酰氯 1-二甲氨基萘-5-磺酰氯英文名称: Dansyl Chloride

大黄素有效期: 2年溶解性: 5mg/ml  EtOH别名: 朱砂莲甲素英文名称: Emodin

辣椒红有效期: 3年别名: 辣椒红素英文名称: CapsanthinCAS: 465-42-9

阿斯巴甜有效期: 3年溶解性: 80mg/mL Water 别名: L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯英文名称: Aspartame

二水槲皮素有效期: 2年级别: 医药级溶解性: 10 mg/mL EtOH别名: 二水栎精; 二水槲皮黄素; 栎精二水合物

齐墩果酸别名: 土当归酸英文名称: Oleanolic acidCAS: 508-02-1分子式: C30H48O3