产品名称:大片吸虫通用PCR检测试剂盒 英文名称:Fasciola spp.PCR 编号:HE30983-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 无三氯化铁/无氯化高铁/无氯化铁/Iron(III) chloride 质量规格:>99%,BR 包装;25g 氯化镍/氯化镍/氯化亚镍/二氯化镍/镍铬合金氯化物/氯化镍(II)物/Nickel chloride hexahydrate 质量规格:>98%,植物激素级 包装;500g 氯化亚锡/二氯化锡/结晶氯化亚锡/氯化锡(II)二合物/Stannic chloride dihydrate 质量规格:BR 包装;1g 无二氯化锡/无氯化亚锡/氯化锡(II)/Tin(II) chloride anhydrous 质量规格:Ind Grade 包装;5g 四氯化锡/结晶四氯化锡/氯化高锡/五四氯化锡/结晶氯化锡/Stannic chloride pentahydrate 质量规格:BS Grade 包装;1g 氯化锌/锌氯粉/Zinc chloride 质量规格:>80%,Ind Grade 包装;25g 氯化铋/三氯化铋/氯化铋(III)/Bismuth Chloride 质量规格:>98%,BR 包装;5g 氯化铬/三氯化铬/六氯化铬/三氯化铬(III)/Chromic chloride hexahydrate 质量规格:BR 包装;100g 无氯化铬(III)/无三氯化铬/无三氯化铬(III)/Chromium(III) chloride anhydrous 质量规格:BR 包装;25g 氯化铟/三氯化铟/Indium chloride 质量规格:BR 包装;5g 氯化亚铁/二氯化铁/氯化铁四合物/四氯化低铁/氯化铁(II)四合物/Iron(II) chloride tetrahydrate 质量规格:>96%,Tech Grade 包装;1g 氯化铅/二氯化铅/氯化铅(Ⅱ)/Lead chloride 质量规格:>98%,BR 包装;5g 四氯化锰/氯化亚锰/二氯化锰/氯化锰(II)四合物/Manganese chloride 质量规格:>98%,BR 包装;1g 氯化亚汞/一(I)/一氯化亚汞(I)/氯化亚汞(I)/Mercuric chloride 质量规格:>98%,BR 包装;25g 氯化银/Silver chloride 质量规格:85%~95%,BR 包装;5g 氯化锶/六氯化锶/二氯化锶/Strontium chloride hexahydrate 质量规格:>97%,BR 包装;1g 氯化铷/Rubidium chloride 质量规格:商品级 包装;25g 大片吸虫通用PCR检测试剂盒Trametes│sp. 中文名称:栓菌属种属:Trametes│sp.提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:抗癌活性培养方法培养基:CM0014生长条件:28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度:97% Fusarium│solani 中文名称:茄病镰刀菌种属:Fusarium│solani提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:Cyclosporin(环孢菌素)产生菌;用于环孢菌素A、C、D、H等培养方法培养基:CM0066生长条件:26-28C存储条件:真空冷冻干燥 纯度:97% Clostridium sporogenes 中文名称:产芽孢梭菌种属:Clostridium sporogenes提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:教学科研培养方法培养基:CM0121生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:96% Salmonella│paratyphi A 中文名称:甲型副伤寒沙门氏菌种属:Salmonella│paratyphi A提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:1,2,12 a -培养方法培养基:CM0051生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:96% Streptococcus hemolytis-α 中文名称:甲型溶血性链球菌种属:Streptococcus hemolytis-α分离基物:来源于卫生部检定所,分离自慢性气管炎患者。提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究;教学;分类。培养方法培养基:哥伦比亚血平板生长条件:37℃,好氧 / 5%CO2生长特性卵圆形或球形的,直径小于2μm。当生长在液体培养基:中时,形成对或链。革兰氏染色阳性。兼性厌氧菌。适温度37℃。化能异养菌。从不形成菌膜,不含有血红素化合物。联阴性,触酶阴性。在5%羊血培养基:上α溶血。低营养要求复杂。存储条件:2-8℃。真空冷冻干燥法 纯度:96% Salmonella enteritidis 中文名称:肠炎沙门氏菌种属:Salmonella enteritidis提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究;教学;分类。培养方法培养基:营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。生长条件:37℃,好氧。生长特性革兰氏阴性杆菌,大小为0.6-2.0μm × 1.0-4.0μm,通常以周生鞭毛运动;兼性厌氧,营养要求不高;不能利用柠檬酸盐作为碳源;产气,大多数菌株不产生H2S,发酵阿拉伯糖而不发酵木糖,仅对人致病,能够引起与伤寒类似的症状。存储条件:2-8℃。-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:97% Bacillus cereus 中文名称:蜡样芽孢杆菌种属:Bacillus cereus提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:产青霉素酶,四环素,胃癌普查培养方法培养基:营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。生长条件:37℃,兼性厌氧生长特性革兰氏阳性杆菌,0.3-2.2μm×1.2-7.0μm,多数运动,鞭毛典型侧生。形成抗热内生孢子;在一个孢子囊细胞中,孢子不多于1个。严格好氧或兼性厌氧。来源于中国药品生物制品检定所抗生素室。存储条件:2-8℃。-80℃冰箱冻结法 纯度:97% Serratia marcescens 中文名称:黏质沙雷氏菌种属:Serratia marcescens分离基物:来源于第二军医大学提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no培养方法培养基:营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。生长条件:37℃生长特性菌落橙色。革兰氏阴性杆菌,以周生鞭毛运动,无芽胞,能利用柠檬酸盐和醋酸盐作为碳源,可产生粉色、红色或深红素,营养要求不高;V. P.反应阳性,M. R.反应阴性;产生脱氧核糖核酸酶;可自土壤、、人和动物的粪便中分离到,可引起肺炎、泌尿道感染、败血症,以及外科术后感染。存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:97% |