丙酸蛛网菌PCR检测试剂盒

实验外包:
1.基因组学：基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学：microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测：Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测：HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学：GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型：原代细胞、细胞模型、动物模型构建
服务流程：
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

​

使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
特点优势：
    1.   特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
    2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
    3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性：产品仅用于科研检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1：序列资源丰富，除TIANDZ公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
可溶性转铁蛋白受体试剂盒 质量规格：≥98%,标准品用于含量测定 包装;1g

可溶性肿瘤坏死因子受体2试剂盒 质量规格：≥98.5%,BR,二合物 包装;25g

可溶性血小板内皮细胞粘附分子1试剂盒 质量规格：纯度>99%,BR,可用于细胞培养 包装;5g

可溶性血纤蛋白单体复合物试剂盒 质量规格：HPLC>98%,标准品 包装;250mg

可溶性血管内皮细胞蛋白C受体试剂盒 质量规格：>99%,BR 包装;1g

可溶性胸苷激酶1试剂盒 质量规格：>99%,标准品 包装;5g

可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1试剂盒 质量规格：>98% 包装;1g

可溶性间皮素相关肽试剂盒 质量规格：>97.0%,BR,可用于细胞培养 包装;5g

可溶性核因子κB受体活化因子试剂盒 质量规格：>98%;ATP竞争性PI3K和mTOR抑制剂 包装;100g

可溶性淀粉酶前体蛋白α试剂盒 质量规格：>98% 包装;25g

可溶性弹性蛋白片段试剂盒 质量规格：>98%,叔丁胺盐形式 包装;5g

可溶性补体激活产物SC5b9 elisa试剂盒 质量规格：>98%,USP 包装;100mg

可溶性白介素7受体试剂盒 质量规格：HPLC>99%,标准品 包装;25mg

可溶性P选择素试剂盒 质量规格：>98% 包装;500mg

可溶性OX40L试剂盒 质量规格：>98% 包装;1g

可溶性Endoglin试剂盒 质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养 包装;250mg

可溶性CD86试剂盒 质量规格：HPLC>99%,标准品 包装;5g
丙酸蛛网菌PCR检测试剂盒Microbulbifersp. 中文名称：微泡菌属种属:Microbulbifersp.分离基物:红树林泥土提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:合成褐藻胶裂解酶。培养方法培养基:CM0444;细菌用海洋液体培养基:[Bactomarinebroth(DIFCO2216)];酵母膏1.0g，蛋白胨5.0g，Fe(III)citrate0.1g，NaCl19.45g，MgCl25.9g，KCl0.55g，Na2SO43.24g，CaCl21.80g，Na2CO30.16g，KBr0.08g，SrCl234.0mg，H3BO322.0mg，NaSiO34.0mg，NaF2.4g，NH4.6mg，Na2HPO48mg，蒸馏1.0L，pH7.6。生长条件:25℃;好氧存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：>98%

Ochrobactrumcytisi 中文名称：金雀儿根瘤苍白杆菌种属:Ochrobactrumcytisi分离基物:金雀儿花的根瘤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:yes应用领域:分类学研究，可降解硝酸盐，解七叶树素。产β-半乳糖酶和β-葡糖苷酶。培养方法培养基:CM0002;营养肉汁琼脂;蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl5.0g，琼脂15.0g，蒸馏1.0L，pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4·H2O，则有利于产生芽孢。生长条件:26℃;好氧存储条件:-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法 纯度：98%

Pseudomonassolanacearum(Smith)Smith 中文名称：青枯假单胞菌(不提供）种属:Pseudomonassolanacearum(Smith)Smith安全等级:1模式菌株:no应用领域:马铃薯青枯病病源菌培养方法培养基:151生长条件:32℃ 纯度：98%

Fusarium moniliforme Sheldon 中文名称：串珠镰孢（斜面）种属:Fusarium moniliforme Sheldon提供形式:斜面安全等级:1模式菌株:no应用领域:粮食霉腐菌培养方法培养基:PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷酸二氢钾 3g，硫酸镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。生长条件:25-28℃，好氧 纯度：98%

Mucor circinelloides van Tieghem 中文名称：卷枝毛霉（斜面）种属:Mucor circinelloides van Tieghem提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:综合PDA：20%马铃薯汁1L，葡萄糖20g ，KH2PO4 3g， MgSO4.7H2O 1.5g，硫胺素微量，琼脂 15g，pH 自然。生长条件:25-28℃，好氧 纯度：97%

PenicilliumroquefortiThom 中文名称：娄地青霉（不提供）种属:PenicilliumroquefortiThom安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:15生长条件:25-26℃ 纯度：97%

Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel 中文名称：云芝（斜面）种属:Coriolus Versicolor (L.:Fr.) Quel提供形式:斜面安全等级:1模式菌株:no应用领域:药用。培养方法培养基:综合PDA：马铃薯煮汁1000mL，磷酸二氢钾 3g，硫酸镁 1.5g，葡萄糖 20g，维生素B1 10mg，琼脂 20g，pH自然。马铃薯煮液：200g马铃薯，去皮，切块，放入蒸馏中煮沸30min，取滤液定容至1000mL,备用。121℃，15min。生长条件:25℃，严格好氧 纯度：97%

EnterobacteragglomeransEwingandFife 中文名称：成团肠杆菌种属:EnterobacteragglomeransEwingandFife安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:2生长条件:37℃ 纯度：98%