产品仅用于科研注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。 产品名称:异尖线虫属PCR检测试剂盒规格 英文名称:Anisakis spp.PCR 编号:HE30612-R 类别:PCR检测试剂盒 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光,快递免费送货上门。 储需要自备的器材: 1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:荧光 PCR 反应管、眼科剪、眼科镊、盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 特点: 1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。 2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。 3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。 4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。 保存条件: 仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法 1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。 3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。 4. 组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。 5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 淋巴细胞抗原6复合物基因座A试剂盒 质量规格:含量测定 包装;100g 淋巴细胞功能相关抗原3试剂盒 质量规格:>99%,USP,可用于细胞培养 包装;25g 淋巴细胞功能相关抗原2试剂盒 质量规格:含量测定 包装;5g 亮氨酰-半胱氨酰氨肽酶试剂盒 质量规格:>95%,BR 包装;1g 亮氨酸富含重复丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶2试剂盒 质量规格:HPLC>95%,标准品 包装;1g 亮氨酸氨基肽酶3试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;250mg 链激酶试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;25g 连蛋白试剂盒 质量规格:>99%,标准品 包装;5g 粒细胞特异性抗核抗体试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;1g 粒细胞趋化蛋白-2试剂盒 质量规格:>97%,BR 包装;5g 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体试剂盒 质量规格:HPLC>97%,标准品 包装;1g 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子试剂盒 质量规格:>95%,蛋白≤0.1% 包装;200mg 粒细胞集落刺激因子试剂盒 质量规格:>98%,BR,可用于细胞培养 包装;100mg 粒细胞集落刺激因子试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;25g 利什曼原虫试剂盒 质量规格:>99%,BR 包装;5g 利钾尿肽试剂盒 质量规格:HPLC≥98%,标准品 包装;1g 李斯特菌抗体试剂盒 质量规格:含量≥670µg/mg 包装;5g 异尖线虫属PCR检测试剂盒规格 Salmonella bovis-morbificans 中文名称:病牛沙门氏菌种属:Salmonella bovis-morbificans提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究、质量控制培养方法培养基:营养肉汁琼脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生长条件:36℃,好氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:无,鳞片, 99.99% metals basis Escherichia│coli EIEC 中文名称:肠侵袭性大肠埃希氏菌种属:Escherichia│coli EIEC分离基物:腹泻病例粪便标本提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no培养方法培养基:CM0002生长条件:37℃存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:95% Clostridium│saccharobutyricum 中文名称:糖丁酸梭菌种属:Clostridium│saccharobutyricum提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:提高白酒的丁酸已酯之含量。培养方法培养基:CM0162生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:99% Hericium│erinaceus 中文名称:猴头菌(猴头,猴头蘑,猴头菇)种属:Hericium│erinaceus提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于食用菌。培养方法培养基:CM0017生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;定期移植法 纯度:99% Paecilomyces│hepiali 中文名称:蝙蝠蛾拟青霉种属:Paecilomyces│hepiali提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:药用,适合液体发酵法菌丝体。培养方法培养基:CM0017生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;定期移植法 纯度:99% Gordonia│amicalis 中文名称:友好戈登氏菌种属:Gordonia│amicalis分离基物:炼油废污泥提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:油品生物脱硫。培养方法培养基:CM0995生长条件:30℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:Rh 21.3% Penicillium│camemberti 中文名称:卡门柏青霉种属:Penicillium│camemberti提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:CM0013生长条件:26℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:Rh 21.3% Salmonella kentucky 中文名称:肯塔基沙门氏菌种属:Salmonella kentucky分离基物:进口冻鸡翼尖提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究、质量控制培养方法培养基:营养肉汁琼脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生长条件:36℃,好氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度: 反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。 ③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。 ⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。 ⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。 ⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。 引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。 技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 产品仅用于科研发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 |