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灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒

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更新日期:
2020-11-03
点击次数:
583
产品特点:
灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒的详细资料:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

 灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒

 英文名称

 Aeromonas salmonicidaPCR

 货号

 HE30587-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建


特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
髓鞘相关糖蛋白抗体试剂盒 质量规格:>98%,BR,细胞培养级 包装;1g

髓鞘相关糖蛋白试剂盒 质量规格:>99%,EP6,BR,可用于细胞培养 包装;5g

髓鞘碱性蛋白抗体试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;1g

髓鞘蛋白P0试剂盒 质量规格:>98.5%,CP2005,BR,可用于细胞培养 包装;5g

髓磷脂碱性蛋白试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;1g

髓磷脂P2蛋白试剂盒 质量规格:≥99%,BR 包装;25g

髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;5g

髓过氧化物酶试剂盒 质量规格:≥98.5%,BR 包装;100mg

酸性铁蛋白试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;25mg

酸性神经鞘磷脂酶试剂盒 质量规格:>99.5%,EP6.2 包装;25g

酸性磷酸酶试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;1g

酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成员E试剂盒 质量规格:>1200u/mg,CP2005 包装;100g

酸性成纤维细胞生长因子试剂盒 质量规格:>98.5%,BR 包装;25g

四氢生物蝶呤试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;1g

四连接素试剂盒 质量规格:>3900IU/MG,EP,BR,可用于细胞培养 包装;250mg

死亡相关蛋白1试剂盒 质量规格:含量测定,标准品 包装;1g

丝裂原活化蛋白激酶激酶6试剂盒 质量规格:>99%,USP 32,BR,可用于细胞培养 包装;1g
灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒Salmonella enterica subsp. 中文名称:肠炎沙门氏菌亚种种属:Salmonella enterica subsp.分离基物:进口麦乐鸡提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究、质量控制培养方法培养基:营养肉汁琼脂培养基::蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。121℃,15min。生长条件:36℃,好氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:用于荧光分析

Hanseniaspora uvarum 中文名称:葡萄汁有孢汉逊酵母种属:Hanseniaspora uvarum分离基物:苹果提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:用于果酒发酵研究培养方法培养基:CM0077生长条件:28℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:90%,for fluorescence

Bacillus altitudinis 中文名称:高地芽胞杆菌种属:Bacillus altitudinis分离基物:红树林土壤提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:产纤维素酶 ,可降解羧甲基纤维素CMC。培养方法培养基:营养肉汁琼脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0生长条件:25-28℃,好氧,24h,镜检为阳性短杆菌,菌种纯。存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:≥99%

Escherichia coli 中文名称:大肠埃希氏菌(冻干粉)种属:Escherichia coli分离基物:人的粪便提供形式:冻干管安全等级:1模式菌株:no应用领域:血清型:O157:H7。伴出血性肠炎培养方法培养基:营养肉汁琼脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。生长条件:37℃,好氧存储条件:2-8℃冷藏 纯度:99%

Cordyceps militaris 中文名称:蛹虫草(北冬虫夏草,北虫草)(斜面)种属:Cordyceps militaris提供形式:斜面培养物,冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究;。、药用,适合液体发酵菌丝体。培养方法培养基:综合PDA琼脂:马铃薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,维生素B1 微量,琼脂 15.0g,pH6.0。生长条件:25℃,好氧生长特性15天长满斜面,菌丝洁白、浓密、丰厚、菌丝绒毛状。液体深层发酵温度23-25℃,pH值为5.5-7,发酵周期3-4天。存储条件:2-8℃。液氮超低温冻结法;定期移植法 纯度:99%

Rhodopseudomonas palustris 中文名称:沼泽红假单胞菌(菌液)(暂无)种属:Rhodopseudomonas palustris提供形式:仅提供菌液安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究;。应用于番茄红素、水质净化和作为饲料添加剂等方面。培养方法培养基:112 Van Niel's Yeast Agar:K2HPO4 1.0 g,MgSO4 0.5 g,酵母提取物 10.0 g,蒸馏水 1000 ml,pH 7.0-7.2。121℃,15min。生长条件:30℃,厌氧,在钨丝灯下培养生长特性光合细菌存储条件:2-8℃。 纯度:98%

Escherichia coli O157 中文名称:肠致病性大肠埃希氏菌种属:Escherichia coli O157分离基物:腹泻病例粪便标本提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:研究。《GB/T 4789.6-2003致泻大肠埃希氏菌检验》阳性对照菌株。培养方法培养基:营养肉汁琼脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。生长条件:37℃,好氧。生长特性革兰氏阴性杆菌,在麦康凯培养基:上生长成红色菌落,菌落圆而突起,能发酵乳糖。存储条件:-80℃冰箱冻结法;2-8℃,真空冷冻干燥法 纯度:98%

Staphylococcus aureus subsp.aureus Rosenbach 中文名称:金黄色葡萄球菌亚种种属:Staphylococcus aureus subsp.aureus Rosenbach分离基物:临床分离提供形式:冻干管、试管斜面安全等级:2模式菌株:no应用领域:耐甲氧西林培养方法培养基:Trypticase Soy Agar(TSA):胰蛋白胨15g,大豆蛋白胨5.0 g ,氯化钠 5.0 g ,蒸馏水1000.00 ml, 琼脂 15.0 g ,pH 7.3生长条件:37℃,好氧存储条件:4℃,避光冷藏。 纯度:≥99%

 

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