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化脓放线菌PCR检测试剂盒说明书

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更新日期:
2020-11-03
点击次数:
551
产品特点:
化脓放线菌PCR检测试剂盒说明书实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
  50T化脓放线菌PCR检测试剂盒说明书的详细资料:

服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。

产品名称

化脓放线菌PCR检测试剂盒说明书

 英文名称

 Actinomyces pyogenesPCR

 货号

 HE30581-R

实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建


特点优势:
    1.   特异性:所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过TIANDZ及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
    2.   重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
    3.   灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
    4.   实用性:产品仅用于科研检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
     5.   优势1:序列资源丰富,除TIANDZ公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
    6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 产品仅用于科研先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
维生素E试剂盒 质量规格:≥98.0% 包装;100g

维生素D受体试剂盒 质量规格:>98%,USP31,BR 包装;25g

维生素D结合蛋白试剂盒 质量规格:>98%,标准品 包装;5g

维生素D3试剂盒 质量规格:>99%,BR,细胞培养级 包装;10g

维生素D2试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;2g

维生素C试剂盒 质量规格:>98% 包装;100g

维生素B6试剂盒 质量规格:≥580IU/ mg,BR 包装;25g

维生素B3试剂盒 质量规格:含量测定 包装;5g

维生素B2试剂盒 质量规格:≥98%,BR,醋酸盐形式 包装;1g

维生素B12试剂盒 质量规格:>99%,用于药理造模 包装;5g

维生素B1试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;1g

维生素A试剂盒 质量规格:>98.0%,JP2002 包装;5g

微管相关蛋白tau试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;1g

微管相关蛋白2试剂盒 质量规格:>98.5% 包装;5g

微管相关蛋白1A/1B轻链3B试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;100g

微管相关蛋白1A/1B轻链3A试剂盒 质量规格:>99.0%,BR 包装;25g

微管微丝交联因子1试剂盒 质量规格:HPLC>98%,标准品 包装;5g
化脓放线菌PCR检测试剂盒说明书StreptococusthermophilusOrla-Jensen 中文名称:嗜热乳酸链球菌种属:StreptococusthermophilusOrla-Jensen安全等级:1模式菌株:no培养方法培养基:5,44生长条件:50℃ 纯度:98%

Cordyceps│militaris 中文名称:蛹虫草(北冬虫夏草,北虫草)种属:Cordyceps│militaris提供形式:斜面培养物安全等级:1模式菌株:no应用领域:、药用,适合液体发酵菌丝体。培养方法培养基:CM0017生长条件:25℃存储条件:液氮超低温冻结法;定期移植法 纯度:AR,99.5%

Vibrio anguillarum 中文名称:鳗弧菌种属:Vibrio anguillarum提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:研究、质量控制。培养方法培养基:细菌用海洋液体培养基:[Bacto marine broth (DIFCO 2216)]:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,Fe(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸馏水 1.0L,pH7.6。121℃,15min。生长条件:20℃,好氧存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:AR,99.5%

Aeromonas sobria 中文名称:温和气单胞菌种属:Aeromonas sobria分离基物:鱼提供形式:冻干粉安全等级:1模式菌株:yes培养方法培养基:营养肉汁琼脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生长条件:30℃,好氧 纯度:98%

Streptococcus pyogenes 中文名称:化脓性链球菌(酿脓链球菌)种属:Streptococcus pyogenes分离基物:患有流行性咽炎的儿童咽部提供形式:冻干物安全等级:2模式菌株:no应用领域:培养基:质控,A组链球菌质控菌株;BBL、生物梅里埃Vitek、IDS和Micro-Media产品质控菌株。培养方法培养基:脑心浸液琼脂(BHI):牛脑浸粉 4.0g,牛心浸粉 4.0g,蛋白胨 5.0g,酪蛋白胨16.0g,NaCl 5.0g,葡萄糖 2.0g,磷酸氢二钠 2.5g,琼脂 20.0g,pH7.4 ± 0.2。121℃,15min。生长条件:37℃,好氧存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Fusarium solani 中文名称:腐皮镰孢(斜面)种属:Fusarium solani提供形式:仅提供斜面安全等级:2模式菌株:no培养方法培养基:马铃薯、葡萄糖琼脂培养基:(PDA):马铃薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,琼脂 15.0g,pH自然。[注] 马铃薯提取液:取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1.0L煮沸30min,滤去马铃薯块,将滤液补足至1.0L。传代方法①冻干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂轮在冻干管壁划两圈,掰断,用200μL无菌水或培养基:充分溶解,平板涂布,活化培养。 ②斜面:试管口用75%酒精擦拭后,火焰灼烧,后用无菌接种铲切块,挑取接入平板或斜面,培养。生长条件:24℃,好氧存储条件:2-8℃冷藏,冻干管10年以上,斜面1-3个月。 纯度:98%

Vibrio fischeri 中文名称:费舍尔弧菌种属:Vibrio fischeri提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:水或污水毒性检测。培养方法培养基:海洋细菌培养基:[Bacto marine broth (DIFCO 2216)]:酵母膏 1.0g,蛋白胨 5.0g,Fe(III) citrate 0.1g,NaCl 19.45g,MgCl2 5.9g,KCl 0.55g,Na2SO4 3.24g,CaCl2 1.80g,Na2CO3 0.16g,KBr 0.08g,SrCl2 34.0mg,H3BO3 22.0mg,NaSiO3 4.0mg,NaF 2.4g,NH4NO3 1.6mg,Na2HPO4 8mg,蒸馏水 1.0L,pH7.6。生长条件:20-22℃,好氧存储条件:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 纯度:98%

Clostridium circulans 中文名称:环状芽胞杆菌种属:Clostridium circulans分离基物:窖泥提供形式:冻干物安全等级:1模式菌株:no应用领域:丁酸、香料或酿酒。培养方法培养基:CM0858生长条件:37℃存储条件:真空冷冻干燥法 纯度:98%

 

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