产品名称:乙酸激酶(ACK)活性试剂盒说明书 规格:48样、96样、 货号:GOY-016617 检测方法:紫外分光光度法、微板法 产品分类:呼吸代谢途径系列 公司产品仅用于科研贮存温度:2~8℃。 本试剂盒保质期:6个月 【实验前溶液配制】 配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复 溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。 配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19 稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量 配制洗涤液。 配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份 浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。 【所用仪器、试剂】 仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装 置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 试 剂:乙腈、中性氧化铝
测定步骤: 1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。 2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。 3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制) 4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂) 选择抗凝的注意点: ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆); ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 鸭疫里氏杆菌10倍酵母菌SD-URA培养基(半乳糖)猪促生长激释放激(GHRH)试剂盒 橙色杆状菌酵母菌SD-URA培养基(半乳糖+棉籽糖)猪促卵泡(FSH)试剂盒 褐球固氮菌*10倍酵母菌SD-URA培养基(半乳糖+棉籽糖)猪Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)试剂盒 埃切毕赤酵母酵母菌SD-LEU/TRP/HIS培养基猪表皮生长因子(EGF)试剂盒 球孢白僵菌酵母菌SD-TRP/URA培养基猪白介8(IL-8/CXCL8)试剂盒 多分枝灵芝10倍酵母菌SD-TRP/URA培养基猪白介6(IL-6)试剂盒 植物乳杆菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培养基猪白介4(IL-4)试剂盒 美澳型核果褐腐病菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE培养基猪白介3(IL-3)试剂盒 犁黑轮斑交链孢霉酵母菌SD-ADE培养基猪白介2(IL-2)试剂盒 季也蒙迈耶氏酵母酵母菌SD-ADE培养基猪白介1β (IL-1β)试剂盒 空肠弯曲杆菌酵母菌SD-TRP/HIS培养基猪白介18(IL-18)试剂盒 宇佐美曲霉酵母菌SD-TRP/HIS培养基猪白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒 贝氏葡萄座腔菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE/LEU培养基猪白介10(IL-10)试剂盒 类产碱假单胞菌酵母菌SD-TRP/HIS/ADE/LEU培养基猪白介1(IL-1)试剂盒 酿酒酵母酵母菌*补充混合(CSM)培养基猪Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)试剂盒 居海绵溶杆菌酵母菌*补充混合(CSM-HOLLENBERG)培养基猪Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)试剂盒 毛柄金钱菌(金针菇)酵母菌*补充混合(CSM-BRENT)培养基猪间粘附分子2(ICAM-2/CD102)试剂盒 黄色孢链霉菌酵母菌*补充混合(CSM-HOPKINS)培养基猪间粘附分子3(ICAM-3/CD50)试剂盒 总状共头霉酵母菌CSM-△LEU/△TRP培养基猪纤溶原激活物抑制因子1(PAI-1)试剂盒 环圈链霉菌真菌格莫瑞六亚甲基四胺(Gomori's Methenamine Silver;GMS)银染试剂盒猪纤溶原激活物抑制因子(PAI)试剂盒 乙酸激酶(ACK)活性试剂盒说明书色氨-5-羟化检测试剂盒单丝氨激1抗体 N-乙-5-羟色甲基转移检测试剂盒低分子量体7抗体 盐还原检测试剂盒促黄体生成抗体 蔗糖合成检测试剂盒层粘α1抗体 番茄黑环病检测试剂盒LETM1抗体 可溶性检测试剂盒乳脱氢抗体 山梨脱氢检测试剂盒化丝氨/苏氨激抗体 麦胚凝集检测试剂盒层粘连β1抗体 操作步骤: 实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
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