产品名称:NADP苹果酸酶(NADP-ME)试剂盒规格 规格:48样、96样、 货号:GOY-016631 检测方法:可见分光光度法、微板法 产品分类:呼吸代谢途径系列 公司产品仅用于科研贮存温度:2~8℃。 本试剂盒保质期:6个月 【实验前溶液配制】 配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复 溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。 配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19 稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量 配制洗涤液。 配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份 浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。 【所用仪器、试剂】 仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装 置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 试 剂:乙腈、中性氧化铝
测定步骤: 1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。 2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。 3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制) 4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂) 选择抗凝的注意点: ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆); ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 暗盖淡鹅膏菌酵母V型ATP(V type ATPase )活性比色法定量检测试剂盒小鼠白介1(IL-1)试剂盒 巨大芽胞杆菌植物V型ATP(V type ATPase )活性比色法定量检测试剂盒小鼠白介1β (IL-1β)试剂盒 耐久肠球菌动物细胞线粒体F型ATP(F type ATPase)活性比色法小鼠肌红(MYO/MB)试剂盒 塔宾曲霉定量检测试剂盒小鼠血栓B2(TXB2)试剂盒 分枝节杆菌动物组织线粒体F型ATP(F type ATPase)活性比色法小鼠乙(ACH)试剂盒 浅天青链霉菌定量检测试剂盒小鼠白三烯B4(LTB4)试剂盒 Sporosarcina植物叶绿体F型ATP(F type ATPase)活性比色法小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)试剂盒 盘长孢状盘孢定量检测试剂盒大鼠活化A受体抗体(ACV-RAb)试剂盒 浅白隐球酵母细菌F型ATP(F type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠脑红(NGB)试剂盒 豌豆根瘤菌酵母F型ATP(F type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠血小板生成(TPO)试剂盒 棉阿舒囊霉A型ATP(A type ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)试剂盒 Lactobacillus brevis动物细胞总ATP(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠Bcl-2相关X(BAX)试剂盒 柠檬色短小杆菌动物组织总ATP(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠甘露糖结合/甘露糖结合凝集(MBP/MBL)试剂盒 游动放线菌*细菌总ATP(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠白介7(IL-7)试剂盒 格氏嗜盐碱杆菌酵母总ATP(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠丝氨/苏氨(STK)试剂盒 大肠埃希菌植物总ATP(total ATPase)活性比色法定量检测试剂盒大鼠抗红抗体(RBC)试剂盒 中慢生华癸根瘤菌甲羟戊(MEVALONATE)通路分析试剂专题大鼠CD3分子(CD3)试剂盒 黄杆菌名称大鼠c-Jun氨基末端激(JNK)试剂盒 黑木耳通用性甲羟戊(mevalonate)含量高效液相层析-质谱法定量检测试剂盒大鼠高铁血红(MHB)试剂盒 大孢枝孢菌细胞甲羟戊(mevalonate)含量高效液相层析-质谱法定量检测试剂盒大鼠二氧化(DAO)试剂盒 NADP苹果酸酶(NADP-ME)试剂盒规格生物羧化检测试剂盒组乙转移PCAF抗体 转羧基检测试剂盒化原癌基因c-kit抗体 β--ACP合II检测试剂盒化原癌基因c-kit抗体 β--ACP合I检测试剂盒离子通道Kv3.1抗体 葡萄糖内酯检测试剂盒激肽释放11抗体 羧基转移β亚基检测试剂盒k轻链抗体 脂检测试剂盒丝氨/苏氨激KIST抗体(激相互作用与白血病相关基因) β甘露聚糖检测试剂盒驱动KIF5A抗体 操作步骤: 实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
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