公司产品仅用于科研测定步骤: 1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。 2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。 3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制) 4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂) 产品名称:NADH氧化酶(NOX)试剂盒品牌 规格:48样、96样、 货号:GOY-016604 检测方法:可见分光光度法、微板法 产品分类:呼吸代谢途径系列 贮存温度:2~8℃。 本试剂盒保质期:6个月 【实验前溶液配制】 配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复 溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。 配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19 稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量 配制洗涤液。 配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1份 浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。 【所用仪器、试剂】 仪 器:微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装 置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g ) 微量移液器:单道 20μl~200μl、100μl~1000μl、多道 250μl 试 剂:乙腈、中性氧化铝
选择抗凝的注意点: ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆); ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 操作步骤: 实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 phospho-P53 (Thr81) 化肿瘤抑制基因P53抗体白介33(IL-33)ELISA试剂盒 phospho-p53BP1(Ser25/29) 化p53结合1抗体白介32(IL-32)ELISA试剂盒 WIG-1 p53活化基因608单克隆抗体白介31(IL-31)ELISA试剂盒 PAG608 p53活化基因608单克隆抗体白介3(IL-3)ELISA试剂盒 PAG608 p53活化基因608单克隆抗体白介2诱导的T激(ITK)ELISA试剂盒 p58ipk p58ipk抗体白介2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 P63 protein P63 肿瘤抑制基因抗体白介2受体(IL2R)ELISA试剂盒 Phospho-p63 (Ser395) 化P63肿瘤抑制基因抗体白介2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒 Phospho-p63 (Ser455) 化P63肿瘤抑制基因抗体白介2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒 Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 化P63肿瘤抑制基因抗体白介29(IL-29)ELISA试剂盒 P73 protein P73肿瘤抑制基因抗体白介28B(IL-28B)ELISA试剂盒 Phospho-p73 (Tyr99) 化P73肿瘤抑制基因抗体白介28A(IL-28A/IFN-λ2)ELISA试剂盒 p70 S6 Kinase/P70 Beta1 核糖体S6激抗体白介27(IL-27)ELISA试剂盒 phospho-P70 S6 Kinase beta (Thr228) 化核糖体S6激抗体白介26(IL-26)ELISA试剂盒 p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖体S6激β2抗体白介25(IL-25)ELISA试剂盒10倍PCR*缓冲100次降压(NT)重组人Apelin 36(AP36)ELISA试剂盒, 一步法PCR反应20次胶质纤维性(GFAP)重组人假定LOC677340 ELISA试剂盒, 超白金TAG DNA聚合200 U介B(NMB)重组人CCAAT增强子结合δ(C/EBPδ)ELISA试剂盒, 三脱氧核糖核苷(dNTPs)混合2.5或10mM/毫升介U(NMU)重组人(AZT)ELISA试剂盒, 一步法平端PCR反应50次颗粒(NRGN)重组小鼠凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒, 一步法荧光定量PCR反应20次生长因子(NGF)重组小鼠氨(LPA)ELISA试剂盒, 因化特异性PCR扩增(MSP)试剂盒60次束(NFASC)重组小鼠白介1(IL-1)ELISA试剂盒, RNA纯化试剂专题肽S(NPS)重组大鼠氧化低密度脂抗体(OLAb)ELISA试剂盒, 名称规格黏附分子(NCAM)重组大鼠5羟色(5-HT)ELISA试剂盒, 大量总RNA氯化铯纯化试剂盒10次纤维网1(NRP1)重组鱼促黄体激 全血总RNA纯化试剂盒20次型一氧化氮合(NOS1)重组5-羟-DL-色氨 组织总RNA纯化试剂盒20次营养因子3(NT3)重组贝萼皂苷元 Bayogenin 细胞总RNA纯化试剂盒20次营养因子4(NT4)重组Na-对磺-L-氨氯 植物总RNA纯化试剂盒(低多糖/)20次元特异性烯化(NSE)重组朝藿定C Epimedin C 植物总RNA纯化试剂盒(高多糖/)20次元正五聚Ⅱ(NPTX2)重组Fmoc-L-羟脯氨 NADH氧化酶(NOX)试剂盒品牌肉脂转移检测试剂盒布氏杆菌菌体抗体 肉软脂基转移1检测试剂盒化B-Raf抗体 肉软脂基转移2检测试剂盒化B-Raf抗体 乳清核糖转移检测试剂盒多聚合激3化抗体 乳检测试剂盒癌易感基因1抗体 乳脱氢检测试剂盒Bcl-2同源拮抗剂抗体 乳脱氢A检测试剂盒β3肾上腺能受体抗体 乳铁检测试剂盒脑钠/利钠肽抗体
|