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 首页>>产品展示>>生理生化检测试剂盒>>脂肪酸系列>>脂氧合酶(LOX)试剂盒说明书

脂氧合酶(LOX)试剂盒说明书

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更新日期:
2022-01-23
点击次数:
387
产品特点:
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  脂氧合酶(LOX)试剂盒说明书的详细资料:

产品名称:脂氧合酶(LOX)试剂盒说明书

规格:48样、96样、

货号:GOY-016665

检测方法:紫外分光光度法、微板法

产品分类:脂肪酸系列

公司产品仅用于科研贮存温度:28℃

本试剂盒保质期:6个月

图片1.png 

【实验前溶液配制】

配液1、将2X浓缩复溶液用去离子水按照1:1稀释(1 份浓缩复

溶液+1份去离子水)用于样本的复溶。

配液2、将40ml浓缩洗涤液(20倍浓缩)用去离子水按照1:19

稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水),或按 所需用量

配制洗涤液。

配液3、将30X浓缩样品提取液用去离子水按照1:29稀释(1

浓缩洗涤液+29份去离子水),或按所需用量配制洗涤液。

【所用仪器、试剂】

       :微孔板酶标仪450nm/630nm、旋转蒸发仪/氮气吹干装

置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )

微量移液器:单道 20μl~200μl100μl~1000μl、多道 250μl

           :乙腈、中性氧化铝


3.png

 

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水149稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.40.5ml血浆);

、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

Phospho-PRAS40 (Thr246)  化激AKT底物1抗体Syndecan-1/CD138(SDC1)ELISA试剂盒

X protein (N-Terminus)  乙肝病X抗体(N端)STEAP家族成员4(Steap4)ELISA试剂盒

Profilin 1  前纤维1抗体STEAP家族成员1(Steap1)ELISA试剂盒

X protein (C-Terminus)  抗乙肝病X抗体(C端)Stathmin 1(STMN1)ELISA试剂盒

Profilin 2  前纤维2抗体STAT3抑制分子(PIAS3)ELISA试剂盒

Protein G  重组G抗体SPARC相关模块化钙结合2(SMOC2)ELISA试剂盒

Protein A  重组A抗体SPARC相关模块化钙结合1(SMOC1)ELISA试剂盒

RAM-11  RAM-11抗体SHC转化1(SHC1)ELISA试剂盒

RAMP-1  受体活性修饰1抗体SH2携带(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒

RACK1  受体激活激C1抗体Salusin Beta(Salusin β)ELISA试剂盒

PRMT1  质精氨甲基转移1抗体Salusin Alpha(Salusin α)ELISA试剂盒

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人体ERβ因化检测试剂盒20次转化生长因子β诱导(TGFβI)重组鲑鱼补体4

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人体SOCS-3因化检测试剂盒20次转状(TTR)重组卵黄琼脂础   加入卵黄,用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养

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小鼠p16因化检测试剂盒20次棕榈化膜6(MPP6)重组人表面活性ASP-AELISA试剂盒, SP-A ELISA kit

大鼠p16因化检测试剂盒20次足突(PDCN)重组人肺表面活性物质相关ASP-AELISA试剂盒,SP-A ELISA kit

小鼠PR因化检测试剂盒20次足盂(PCX)重组人氨转氨/谷转氨(ALT/GPTELISA试剂盒, ALT/GPT ELISA kit
脂氧合酶(LOX)试剂盒说明书松弛肽;松弛检测试剂盒2号染色体开放阅读框50抗体

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操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。


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