人视网膜神经胶质瘤细胞(通常指 WERI-Rb-1 细胞系)是研究视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma, RB)的核心体外模型,具有明确的分子特征和稳定的生物学。
一、遗传与分子特征
RB1基因状态:携带RB1基因双等位缺失,导致pRb蛋白功能丧失,是研究RB1通路失活的理想模型
细胞周期异常:因pRb缺失,G1/S检查点失控,细胞持续进入S期,促进肿瘤发生
基因组稳定性:长期传代可能产生遗传漂变,建议早期冻存主细胞库以保持遗传一致性
二、细胞功能特性
抗失巢凋亡能力
作为悬浮细胞系,WERI-Rb-1具备抵抗失巢凋亡(anoikis resistance)的特性,模拟肿瘤细胞脱离原发灶后仍能存活的能力,适用于转移机制研究。
高增殖活性
在适宜条件下,细胞倍增时间约为24–36小时,适合进行高通量药物筛选或周期动力学分析。
可转染性
可通过脂质体转染、电穿孔或病毒载体实现外源基因导入,适用于:
基因过表达或沉默(如shRNA、CRISPR/Cas9)
报告基因构建(如荧光素酶、GFP标记)
三、免疫学与治疗相关特性
免疫原性较低:作为肿瘤细胞,具有一定免疫逃逸能力,但可通过DC-CIK联合疗法增强机体识别与杀伤效果
四、培养与操作特性
培养基需求:推荐使用RPMI-1640 + 10% FBS + 1%双抗,在37℃、5% CO₂条件下培养
传代比例:建议1:2至1:4,维持细胞密度在1×10⁵–1×10⁶ cells/mL
冻存稳定性:使用含DMSO的冻存液可长期保存,复苏后活性通常可达80%以上