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小鼠主动脉内皮细胞提取物操作要点

点击次数:1949 更新时间:2022-10-20
 

小鼠主动脉内皮细胞提取物操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

苏云金芽胞杆菌杀虫亚种 Bacillus thuringiensis subsp. entomocidus

苏云金芽胞杆菌幕虫亚种 Bacillus thuringiensis subsp. finitimus

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

印第安那亚种 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

苏云金芽胞杆菌以色列亚种 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis

苏云金芽胞杆菌以色列亚种 Bacillus thuringiensis subsp. israelensis

苏云金芽胞杆菌日本亚种 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis

大肠杆菌 Escherichia coli

球孢链霉菌 Streptomyces globisporus


 
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