1、使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。
2、取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。
3、空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4、混匀，置37℃反应30分钟。
5、扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。
6、每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7、洗涤，同步骤5。
8、每孔ELISA试剂盒依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。
9、每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
RD elisa试剂盒的操作注意事项：
1、操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。
2、终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3、酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4、浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以*溶解。
