所有试剂使用前需*解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1、样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2、扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMDRT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1μl(也可根据每头份用量计算N+1份FMDRT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20u至单个PCR反应管)。
PCR核酸检测试剂盒的技术参数:
1.符合行业标准SN/T1686-2005《新城疫病毒中强毒株检测方法:荧光RT-PCR法》的检测要求,可用于禽肉、禽类组织脏器、禽类排泄和分泌物,及其泄殖腔和咽喉拭样中新城疫病毒的检测。
2.灵敏度:对于接种的鸡胚尿囊液,检测的zui高稀释度可达10-8~10-7,与鸡胚病毒分离方法的灵敏度接近。定量检测线性范围可达10-1010拷贝/ml。
3.特异性:采用新基因序列数据库设计,并通过系统验证,新城疫病毒RT-PCR能够检测所有己知新城疫病毒毒株。对于其它禽类感染因子,本试剂盒检测结果为阴性。
4.产品盒组成:(不包括新城疫病毒RNA提取试剂,用户可采用通用型病毒RNA提取试剂盒或试剂盒推荐的提取方法。)组成成份规格数量RNA提取液30ml1瓶DEPC水5ml1瓶新城疫病毒RT-PCR一步法反应液920ul1管逆转录酶管TaqHS酶管新城疫病毒阳性对照100ul1管新城疫病毒阴性对照100ul1管使用说明书一份。