PCR检测试剂盒利用DNA扩增的线性原理，可以测定样品中已知序列的绝对或相对量。qPCR会监测每个PCR循环中的DNA扩增。当DNA处于对数线性扩增阶段时，荧光量相对于背景增加。荧光积累至可测的那一点称为阈值循环(CT)或交叉点。通过使用已知量的标准DNA的多次稀释，可以产生对比CT的对数浓度的标准曲线。然后可以从其CT值计算未知样品中DNA或cDNA的量。适用于多色荧光PCR仪。
PCR检测试剂盒的使用注意事项：
1.实验前请仔细阅读检测试剂盒说明书，严格按步骤执行，不使用检测试剂盒提供的组份或不按照说明书进行实验可能导致错误结果。
2.所有试剂应在规定温度储存。-20℃保存的试剂在使用前应充分混匀。试剂盒反复冻融次数不宜超过5次。
3.实验操作应按照国家有关临床基因扩增实验室管理规范执行，实验过程应分区(试剂准备区、样本制备区、核酸扩增区)，各区物品为专用，不得交叉使用，避免污染。
4.操作台、移液器、离心机等仪器用品应经常用1%次氯酸钠、75%乙醇或紫外灯进行消毒。耗材应进行无酶处理。
5.待检样本、试剂盒组份及实验中的废弃物需按照具有潜在传染性物质处理方法进行处理。
6.为防止荧光干扰，应避免使用含荧光物质的手套，避免用手直接接触，预防交叉污染。
7.检测结果为阴性，并不*代表为非感染状态，具体诊断需结合兽医临床。
8.产生假阴性的可能原因为：待检样本在采集、运输、保存及核酸提取过程中操作不当造成DNA降解；样本中核酸浓度低于z低检测限；病毒待测靶基因出现变异；未经验证的其他干扰因素。
9.产生假阳性的可能原因为：待检样本采集、运输及核酸提取过程中发生交叉污染。
本期介绍就到这里了，相信看完这篇文章你一定知道PCR检测试剂盒使用中应该注意什么了吧？
