pcr与核酸检测是怎么区别的?pcr核酸检测试剂盒的检验原理又怎么样
聚合酶链式反应简称PCR(PolymeraseChainReaction)(又称:多聚酶链式反应)PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。
1、核酸检测是要对核酸序列进行测序的方法,可以使用核酸分析仪进行分析。核酸分析仪包括一个电泳系统、一个激光激发系统、一个荧光检测系统、一台电脑图像、数据处理机及一台彩色激光打印机。采用四种不同的荧光素来代替传统的同位素测序检测。这四种互不相关、具有各自特异的激发和发射波长约荧光素标记的引物。可分别用于双脱氧法DNA合成的四组反应中,反应产物可以混合后在凝胶的单条泳道上完成整个测序反应。2、而PCR,中文译为聚合酶链式反应,其实是一种DNA的快速扩增技术,其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”那样。PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用,可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。比如说在“DNA指纹”中我们提到,科学家们只需要一根头发甚至一个细胞就可以完成DNA指纹的鉴定工作,这里实际上就要采用PCR技术,因为一个细胞中的DNA含量实在太少了,人们根本不可能检测到它的指纹;有了PCR技术就好办了,通过PCR技术把这个细胞中的DNA片断扩增1000万倍,这样DNA量就足够作指纹鉴定了。
pcr核酸检测试剂盒产品特点:
高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
需要注意什么:
pcr核酸检测试剂盒反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法(CoolStartMethod)与热启动法(HotStartMethod)相结合,更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应,增强PCR扩增的特异性,能得到良好的PCR结果。
pcr核酸检测试剂盒的检验原理
本试剂盒基于荧光PCR的原理结合一步RT-PCR以及Taqman荧光探针技术,采用四色荧光PCR在全封闭的扩增体系中检测肠道病毒EV,EV71和CA16的特异性基因片段,从而实现对样本的多重快速检测。同时在体系中检测内参基因,对待测样本的RNA提取及扩增进行全程监控,可以防止假阴性的出现。
本试剂盒采用磁珠离心法进行核酸纯化,在高盐离子浓度下,基于磁珠表面修饰基团与核酸的特异结合原理进行总核酸的吸附分离,后稳定的回收核酸进行后续PCR扩增。