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进口elisa试剂盒稀释血清的步骤及原因

点击次数:797 更新时间:2018-04-18
 

进口elisa试剂盒实验稀释血清的步骤:
先把蛋白稀释一定的倍数,比如说10倍、20倍稀释(这样可以大体确定一个参数),将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度。阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别。
在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释?有两个原因:
1)竞争抑制比较明显,应稀释竞争物;
2)血清中含有的性腺激素比较低,应该浓缩才对。
血清稀释用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低进口elisa试剂盒本底,当然如果你嫌麻烦我觉得用盐水替代PBS关系也不大。不管你是用直接竞争还是间接竞争,血清的稀释倍数肯定要事先确定,但也不用一点点,你做一个预试验即可,选择OD在1.0左右的稀释倍数,即你的竞争ELISA中阴性孔OD在1.0,这样作出来的曲线比较敏感。
S-Allyl-L-Cysteine    25mg    S-烯丙基-L-半胱氨酸标准品    21593-77-1
Salmeterol Related Compound B    10mg    沙美特罗相关物质B标准品    108928-81-0 
Salmeterol Xinafoate     150mg    昔美酸沙美特罗标准品    94749-08-3 
Salsalate     150mg    双水杨酸酯标准品    552-94-3 
Saquinavir Mesylate     200mg    甲磺酸沙奎拉韦标准品    149845-06-7 
Saquinavir Related Compound A    25mg    沙奎拉韦相关物质A标准品    
Scopolamine Hydrobromide     250mg    氢溴酸东莨菪碱标准品    6533-68-2 
Scopoletin    20mg    东莨菪内酯标准品    92-61-5 
Secobarbital CII    200mg        76-73-3 
Selegiline Hydrochloride     200mg    盐酸司来吉兰标准品    14611-52-0 
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