进口elisa试剂盒实验原理
用抗-HBe包被固相载体后,同时加被检血清和合适滴度中和试剂HBeAg,若被检血清中含有抗-HBe,则与包被抗-HBe竞争结合HBeAg,被检标本中抗-HBe越多,HBeAg被结合越多,而与包被抗-HBe结合就越少,加底物后显色就越浅;反之越深。
主要试剂与器材
elisa试剂盒:内含已包被抗-HBe板条、HRP-抗HBe溶液、中和试剂HBeAg溶液、阳性和阴性对照血清,底物溶液(A液、B液)、终止液、洗涤液。
操作步骤
1.加样:取出干包板条,按编号顺序分别加50μl待检血清、阴性对照血清和阳性对照血清于相应孔中。设空白对照孔,除此孔外,每孔加HBeAg50μl、HRP-抗HBe50μl,振荡混匀后,置43℃(或37℃)温育1h。
2.洗涤:甩去孔内液体,用洗涤液注满各孔,静置20s,甩干。如此重复洗涤4次,在吸水纸上拍干。
3.显色:每孔加显色剂A、显色剂B各50μl,振荡混匀后置37℃避光显色10-15min。
4.终止:每孔加终止液50μl,振荡混匀。
5.酶标仪检测:选用450nm波长,用空白孔调零之后测各孔OD值。
结果分析
P/N≤0.3为阳性。P/N>0.3为阴性。
P/N=待检血清OD值/阴性对照OD值。
注意事项
1.进口elisa试剂盒试剂置2-4℃保存。取用时应先置室温平衡。干包被板条须密封防潮,冻存,取用后余者及时封存。
2.恰当选好HBeAg的浓度。
3.试剂用前应摇匀。
进口、国产 英文名称: 2-氨基-5-羟基萘-7-磺酸 I-Acid 含量: 消毒用,1%
进口、国产 英文名称: 苯磺酸 Benzenesulfonic acid 含量: BR,97%
进口、国产 英文名称: 阿姆斯特朗酸 1,5-Naphthalene disulfonic acid 含量: 高纯,98%
进口、国产 英文名称: 1,5-萘二磺酸二钠盐 Sodium 1,5-naphthalenedisulfonate dibasic 含量: BR,99%
进口、国产 英文名称: 托拜厄斯酸 2-Naphthylamine-1-sulfonic acid 含量: BR,98%
进口、国产 英文名称: 甲磺酸 MSA 含量: BR,99%
进口、国产 英文名称: 甲烷磺酸乙酯 EMS 含量: BR,99%
进口、国产 英文名称: 甲烷磺酸甲酯 MMS 含量: BR,97%
进口elisa试剂盒