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TSZelisa试剂盒技术基础知识讲解

点击次数:1408 更新时间:2017-08-18
 

TSZelisa试剂盒酶免疫技术的分类
酶免疫技术是以酶标记的抗体或抗原为主要试剂的方法,是标记免疫技术的一种。免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法,即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂,以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将抗原或抗体用可以微量检测的标记物(例如放射性核素、荧光素、酶等)进行标记,则在与标本中的相应抗体或抗原反应后,可以不必测定抗原抗体复合物本身,而测定复合物中的标记物,通过标记物的放大作用,进一步提高了免疫技术的敏感性。这种标记免疫技术一般分为两类,一类用于组织切片或其他标本中抗原或抗体的定位;另一类用于液体标本中抗原或抗体的测定。前者属于免疫组化技术范畴,后者则称为免疫测定。

酶免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的酶标记物而分为均相和异相两种类型,实际上所有的标记免疫测定均可分成这两类。以标记抗体检测标本中的抗原为例,按照简单的形式是在试剂抗体过量的情况下进行,其反应式如下:
Ab*Ag代表结合的标记物, Ab*为游离的标记物。如在抗原反应后,先把Ab*Ag与Ab* 分离;然后测定Ab*Ag或Ab*中的标记物的量,从而推算出标本中的抗原量,这种方法称为异相法。如在抗原抗体反应后Ab*Ag中的标记物* 失去其特性,例如酶失去其活力,荧光物质不显荧光,则不需要进行Ab*Ag 与Ab*的分离,可以直接测定游离的Ab* 量,从而推算出标本中的Ag含量,这种方法称为均相法。
在异相法中,抗原和抗体如在液体中反应,分离游离和结合的标记物的方法有许多种。与放射免疫测定相类似的液相异相酶免疫技测定,在某些激素等定量测定中也有应用。但常用的酶免疫测定法为固相酶免疫测定。其特点是将抗原或抗体制成固相制剂,这样在与标本中抗体或抗原反应后,只需经过固相的洗涤,就可以达到抗原抗体复合物与其他物质的分离,大大简化了操作步骤。这种被称为EL1SA 的检测技术成为目前临床检验中应用较广的免疫测定方法。
二、ELISA试剂盒方法类型和操作步骤
TSZelisa试剂盒可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:① 固相的抗原或抗体,② 酶标记的抗原或抗体,③ 酶作用的底物,根据试剂的来源和标本的性状以及检测的条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
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