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大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒技术参数 |
点击次数:626 发布时间:2017/3/28 |
提 供 商: |
上海研生生化试剂有限公司 |
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大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒试剂盒组成 1 20 倍浓缩洗涤液30ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶 2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(1800 μg/ml) 0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶 4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份 5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张 6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个 标本处理及要求 1.血清、血浆标本可直接测定; 2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 3.采集后尽早进行实验,若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反 复冻融。 大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒操作步骤 1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上按序设标准品孔10 孔,在*、第二孔中分别 加标准品100μl,然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;再各取100μl 分 别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后,在第 三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉;再各取50μl 分别加到第五、第六孔中;再在第五、 第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加 到第七、第八孔中;再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、 第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中;再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl, 混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。( 稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为 1200 μg/ml ,800 μg/ml,400μg/ml,200μg/ml,100 μg/ml)。 2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样 品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样 品zui终稀释度为5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,轻轻晃动混匀。 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液:将20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水20 倍稀释后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此 重复5 次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同3。 8. 洗涤:操作同5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后15 分钟以内进行大鼠载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒。 |
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