ELISA试剂质量与仪器使用 1 仪器使用 ELISA方法所用仪器相对简单。移液器要按时校正,这样检验时酶标仪效果会更好。接下来重点讲述一下洗板机的使用问题。洗板机经常出现的问题有:吸液针头要接触酶标板的板底才能吸干净,而触碰板底将会对包被物产生影响;手工洗板容易和污染。我们做了手工洗板和机洗板的比较,除了手工洗板比机洗板空白值略低外,其它没有区别。 洗板机的使用过程中要注意三个方面:(1)洗不同的酶标板时,注意调整吸液头的下降高度,以免因高不适使冲洗针头卡住酶标板;(2)当吸液针头有破损时,吸液端由平端变为尖锐,板底包被物被破坏可能性增加,对结果影响较大,应及时更换;(3)洗液量的控制问题,洗液不足会导致洗涤不干净,尤其是边缘残留的酶标物,洗液太多就容易溢出,另外不同试剂的酶标板所使用的洗液量也有可能不同,所以在选择洗液量的时候要特别注意。 2 试剂质量 ELISA试剂盒、颗粒凝集和其它快速诊断试剂。对于试剂本身的质量问题,试剂的稳定性、敏感性和特异性等指标,由于基层实验室不能得到血清转化盘和大量的阳性标本,不可能进行自己测定 。 在牛ELISA试剂盒操作中,试剂在测定前一定要在室温下恒温30min,如果不经过恒温过程,储存温度和室温的差异会使酶标板上凝集一些小水珠,也使开始反应的温度不恒定,影响到抗原抗体的结合与反应的速度。 在储存上,一般在2~8℃,特别注意试剂盒不能紧贴冰箱储存室后壁摆放,否则试剂会被冰冻,复融后试剂的总体效价将严重偏低,不能使用。 |