本试剂盒仅供研究使用。 药品名称: 通用名:人抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG)酶联免疫分析试剂盒 使用目的: 本试剂盒定性测定人血液、或其它相关组织中抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG) 实验原理: 本试剂盒采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人抗幽门螺旋菌抗IgG(HP-IgG)。用纯化的抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的抗幽门螺旋菌抗体 IgG(HP-IgG)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与 CUTOFF值相比较,从而判定标本中人抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG)的存在与否。 试剂盒组成: 1 20 倍浓缩洗涤液 30ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶 2 酶标试剂 6ml×1/瓶 8 阳性对照 0.5ml×1 瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 阴性对照 0.5ml×1 瓶 4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份 5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张 6 显色剂B液 6ml×1 瓶 12 密封袋 1 个 标本要求: 1.标本处理:血清、血浆标本可直接检测 2.标本按要求制备后尽早进行实验。如不能及时检测,可将标本在-20℃保存一个月,但应避免反复冻融。 3.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 操作步骤: 1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀, 3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液:将20倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用 5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。 7. 温育:操作同 3。 8. 洗涤:操作同 5。 9. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。 结果判定: 试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.15 临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15 阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为人抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG) 阴性 阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为人抗幽门螺旋菌抗体IgG(HP-IgG) 阳性 注意事项 1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。 2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 5.底物请避光保存。 6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm 7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。 规格: 96人份/盒 保存条件及有效期 1.试剂盒保存:;2-8℃。 2.有效期:6个月 |