PCR核酸检测试剂盒
  定量PCR试剂盒
  ELISA试剂盒
  elisa检测试剂盒
  细胞
  生化试剂
  标准品对照品
  科研抗体
  科研细胞株
  生物耗材
  生物培养基
  生化检测试剂盒
  生物耗材、仪器
  免疫组化试剂盒
  BD耗材
  分子生物学试剂盒
  放免试剂盒
  金标法检测试剂盒
  食品检测试剂盒
  Western Blot
  微囊藻毒素
  fbs 胎牛血清
  免费代测ELISA服务
  TSZ elisa试剂盒
  RD elisa试剂盒
  IBL elisa试剂盒
  日本WAKO和光纯药
  *原时间试剂
  免疫组化代测服务
  质粒
  PCR试剂盒
  生化试剂盒
  试剂盒
  蛋白质生物学
  对照品
  生理生化检测试剂盒
  细胞培养
 
 
常用抗凝剂的配制及用法

点击次数:3148 更新时间:2012-04-23
 

常用抗凝剂的配制及用法

在医学实验中常需动物的全身抗凝,采出的全血或血浆有的也需加入适当的抗凝剂抗凝。对抗凝剂的要求是:用量少、溶解度大、不带进干扰实验的杂质。

一、肝素  

(1)肝素抗凝作用原理 

肝素的抗凝作用很强,作死亡复苏等实验时,常用它作动物全身抗凝剂,肝素的抗凝作用主要是抑制凝血致活酶的活力,阻止血小板凝聚以及抑制抗凝血酶等作用,从而使血液不发生凝固。

(2)配制和用量

纯的肝素10mg能抗凝65~125 ml血液(按lmg等于125U,10~20U能抗1 ml血液计)。但由于肝素制剂的纯度高低以及其保存时间长短不等,因而其抗凝效果也不相同。一般可配成1%肝素生理盐溶液,用时取0.1毫升于试管内,100℃烘干,每管能抗凝5~10ml血液。也可将抽血注射器用配好肝素湿润一下管壁,直接抽血至注射器内而使血液不凝。在动物实验作全身抗凝时,一般剂量为:大白鼠2.5~3.0mg/200~300g体质量,兔10mg/kg体质量,狗5~10mg/kg体质量。肝素可改变蛋白质等电点,因此当用盐析法分离蛋白质作蛋白质各部分的测定时,不可采用肝素。市售的肝素钠溶液每毫升含肝素12500U,相当于100mg。

常用抗凝剂的配制及用法

二、草酸盐合剂    

(1)原理

草酸胺能使血细胞略为膨大,而草酸钾能使血细胞微缩小,因此草酸铵与草酸钾按3:2比例配置,可使血细胞体积保持不变;加福尔马林则能防止微生物在血中繁殖。此抗凝剂zui适于作红细胞比积测定。

(2)配制方法及用量

草酸铵1.2g、草酸钾0.8g、福尔马林1.0ml、蒸馏水加至100ml每毫升血加草酸盐合剂0.1ml(即相当草酸铵1.2mg,草酸钾0.8mg)。根据取血量将计算好的草酸盐剂量加入玻璃容器内烤干备用。如取0.5ml于试管,烘干后每管可使5ml血不凝固。

(3)注意事项

草酸的作用在于能够沉淀血凝过程中所必需的钙离子,而达到抗凝目的。用时注意加的量应适中,不能过多,以免妨碍去蛋白质血滤液的制取。不适用于血液内钙或钾的测定,也不能用于血液非蛋白氮测定。

三、枸櫞酸钠

常配成3~5%水溶液。也可直接加粉剂,每毫升血加3~5mg,即可达到抗凝目的。

枸櫞酸钠可使钙失去活性,防止凝血。但其抗凝作用较差,碱性较强,不宜作化学检验之用。仅可用于红细胞沉降速度测定。急性血压测定实验所用枸櫞酸钠为5~6%溶液。

四、草酸钾 

(一)原理和注意事项 

草酸钾为zui常用的抗凝剂。其与血液混合后可迅速与血液中的钙离子结合,形成不溶解的草酸钙,使血液不凝固。常用于非蛋白氮测定,但不适用于测定钾和钙。草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶的活性,故应注意。

(二)配制及使用方法

取草酸钾10g,加蒸馏水少许使溶解,再加蒸馏水至100ml。配制成10%水溶液,如每管加0.1ml则可使5~10ml血不凝。一般如作微量检验,用血量较少,可配制成2%溶液,如每管加0.1ml可使1~2ml血液不凝。

五、乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)

EDTA对血液中钙离子有很大的亲和力,能与钙离子络合而使血液抗凝。每0.8mg可抗凝1ml血液。除不能用于血浆中钙、钠及含氮物质之测定外,适用于多种抗凝

 
上海研生生化试剂有限公司 版权所有 总访问量:846618 地址:上海市嘉定区澄浏公路52号
电话:021-59989018 手机:15201736385 联系人:王小姐 邮箱:3004965319@qq.com
GoogleSitemap ICP备案号:沪ICP备11012944号-8

智能制造网

推荐收藏该企业网站