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肝素钠工艺流程 |
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点击次数:3624 更新时间:2011-09-22 |
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1、盐解:将刮好的新鲜肠粘膜,每 100 斤肠粘膜加入清水 100 斤,按肠粘膜和水的总重量,加入 4%的 工业盐,搅拌均匀,再加烧碱液调 PH 值为 8--9,缓慢升温 50--55 度,加温时每 10--20 分钟加水搅拌一次,恒温 2 小时,注意要间隔搅拌。恒温结束后,要快速升温到 96--98 度,恒温 10 分钟,趁热捞出 上层的渣子。用 100 目尼龙布过滤。 注意加盐过多会使下一步交换吸附含量超过规定,加盐过少,肝素和蛋白质分离不*,碱性过强,会使肝素 降解破坏,收率下降。同时还能使一些蛋白质溶解度增大,造成过滤困难。碱性不足造成提取液偏酸,则 在高温的情况下,肝素迅速破坏,升温过急会使蛋白质早凝固,影响肝素的分解和溶出。 2、吸附:待提取液温度冷至 50--55 度,应检测盐浓度为 3。5--5%时,即可加入 5%已处理号的树脂。 如树脂上含有盐水,需用清水将树脂洗净控干,方可使用。搅拌吸附 6--8 小时,转速 60--80 转/分钟为 宜,搅拌须使树脂上下翻动,否则吸附效果差,收率低。吸附完毕,弃去上层吸附液,然后用 100 目的尼 龙布过滤出树脂。 加入提取液的树脂量: 新树脂可按提取液的 5--6%加入, 旧树脂可按提取液的 8--10%。 3、洗涤:过滤后的树脂用 40 度左右的温水,漂洗干净。再放入与树脂重量相等的盐溶液中(盐溶液的浓 度为 5%左右)洗涤 10--20 分钟,除去低分子肝素和一些蛋白质,然后将树脂过滤。 4、洗脱:*次洗脱将过滤号的树脂放入浓度为 20--22%的盐溶液中搅拌洗脱 5--6 小时,树脂和盐水 的比例为 1:0。7。过滤后将树脂控干进行第二次洗脱,调盐溶液浓度为 16--18%,搅拌 3 小时以上, 树脂和盐水的比例与*次相同,过滤后的水即是药液。 5、除杂:将稀碱水加入洗脱后的药液里,要快搅慢加,调 PH 值为 10--12 搅拌 2 分钟,静止沉淀 20 小 时后,抽出上层药液,下沉的是杂质,且渣子放另外桶内过滤。过滤后的药液和下次药液除杂时合并待用。 6、沉淀:将抽出除杂 后的药液加入盐酸调 PH 值为 7--7。5,即可加入酒精进行沉淀。向药液里加入酒精 要快搅慢加。(由于酒精的浓度不同,因此沉淀肝素的酒精用量不等)用酒精计测量酒精度为 30--35%, 加盖密封,沉淀 20 小时。弃去废酒精收集糊状肝素。注意在抽出废酒精时,不可抽动沉淀的肝素。将多 次的肝素钠浆收集在一起,以备集中脱水干燥。 7、脱水:将的肝素钠浆,用双层的确良布过滤后放入 95%的酒精内浸泡 20 小时,加盖密封。过滤 后按上述方法重复一次,使其充分的将肝素上的水分交换下来。 8、干燥:待肝素钠浆沥干后,放在不锈钢盘中烘干,用铲子来回的翻动,温度保持在 50--55 度,注意温 度低于要求是不易烘干的,温度高于 60 度时会使肝素钠的生物活性下降。干燥后的肝素很易吸潮,应及 时用双层塑料袋密封包装,于通风干燥处存放。 |
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