本法系依据硫酸鱼精蛋白能中和抗凝剂肝素，从而影响血浆凝固时间的原理，测定供试品中肝素含量。
试剂（1）缺血小板人血浆 无菌采集人全血于3.8%枸橼酸钠抗凝剂（9∶1）中，混匀，以每分钟1500转在4℃离心30分钟，用塑料注射器取上层2/3的血浆，以每分钟3500转在4℃离心30分钟，取上层2/3血浆，分装于塑料管中，每支3ml，保存-40℃备用。
（2）三羟甲基氨基甲烷（ Tris）缓冲液（pH7.5） 取三羟甲基氨基甲烷 7.27g、氯化钠5.27g，加水溶解并稀释至1000ml（用盐酸调节pH至7.5）。
（3）脑磷脂混悬液 冻干脑磷脂加水复溶，取适量，用生理氯化钠溶液稀释，稀释后的脑磷脂混悬液应使空白凝固时间在200～300秒。
（4）0.025 mol/L氯化钙溶液 取氯化钙（CaCl2•2H2O）147g溶于1000ml水中,制成1mol/L氯化钙贮备液。临用时,用水将1mol/L氯化钙贮备液稀释40倍。
（5）硫酸鱼精蛋白溶液 取硫酸鱼精蛋白适量，用pH7.5 Tris缓冲液溶解并稀释成每1ml含1～20 mg的溶液。
供试品溶液的制备 于每支含不同浓度的硫酸鱼精蛋白溶液10μl的塑料管中,分别加入按标示量复溶后的供试品0.5ml，混匀。
测定法 在已含有缺血小板人血浆0.1ml的塑料管中，加入脑磷脂混悬液0.1ml，混匀，37℃放置1分钟,加供试品溶液0.1ml、已预热至37℃的0.025 mol/L氯化钙溶液0.1ml,记录凝固时间。用Tris缓冲液（pH7.5）0.1ml替代供试品溶液，同法操作作空白对照。空白对照凝固时间不低于200秒试验成立。取凝固时间zui短的供试品管，作为硫酸鱼精蛋白中和0.5ml供试品中的肝素量。硫酸鱼精蛋白10μg中和1IU肝素。例如凝固时间zui短的供试品管中含硫酸鱼精蛋白30μg，则中和供试品0.5ml中的肝素量则为3IU,即供试品每1ml含6IU肝素。
【附注】（1）直接与血和血浆接触的器具应为塑料制品或硅化的玻璃制品。
（2）采用全自动凝血仪操作时，参考仪器使用说明书进行。