早在1986年Mosmann等[1]依据小鼠分泌的细胞因子谱不同将Th细胞分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、、IL-12、IFN-γ和TNF- α等细胞因子，介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答，参与细胞免疫及迟发型超敏反应。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、 IL-6、IL-10和IL13等细胞因子，其主要功能为刺激B细胞增殖并产生抗体，与体液免疫相关。由于Th1/Th2 亚群及其相互之间的平衡在免疫应答的调节中起着关键的作用，Th1/Th2 平衡的失调与多种疾病的发生发展和预后有着密切的关系。目前已发现许多感染性疾病、自身免疫性疾病、过敏性疾病以及移植排斥反应等都与Th1/Th2 平衡有关。因此建立稳定有效的细胞内因子检测方法对于准确说明Th1/Th2细胞的作用非常重要。目前检测的主要方法有酶联免疫法、ELISPOT法、荧光定量法及原位杂交等方法。流式细胞术检测细胞内因子是一种相对快速、重复性好并能准确定量的方法。我们参照国内外的一些文献，对于人和小鼠Th1和Th2细胞的流式检测方法进行了探索，并比较了两者之间的不同。

材料与方法
试剂
PMA（Sigma）
贮存液：PMA 溶于DMSO 浓度为0.1mg/ml -20℃ 保存。
工作液：贮存液1:100 稀释于RPMI 1640培养基中，此时为1µg/ml。
Ionomycin（Sigma）
贮存液：Ionomycin 溶于DMSO 浓度为1mg/ml -20℃ 保存。
工作液：贮存液1:20 稀释于RPMI 1640 培养基中，此时为50µg/ml。
GolgiStop（内含Monensin ，BD Pharmingen）
Cytofix/Cytoperm液、Perm/Wash液和FACS Lysing Solution，均购自BD Pharmingen。

抗体
细胞表面标记抗体：抗人CD3-APC，CD8-PercP，CD8-CYC，CD4-CYC。抗小鼠CD4-CYC、CD8PE。
细胞内因子抗体：抗人IL-4-PE, IFN-γ-FITC。抗鼠IL-4-PE, IFN-γ-FITC。以上抗体均购自BD Pharmingen。