HPLC使用过程中常见问题及解决方法
1. 排气阀里的过滤经常芯堵塞
如果是排气阀里的过滤芯堵塞引起的压力升高，请仔细检查一下换下来的过滤芯。正常情况下，一个过滤芯可以使用6个月左右，如果经常更换就有问题。
- 如果过滤芯的颜色发黑，说明是被柱塞密封垫磨损下来的碎屑堵塞的，请确认流动相使用的缓冲盐的浓度是否太高了，是否使用了柱塞清洗装置。 缓冲液在泵头内部析出的盐的结晶会加速密封垫的磨损。
- 如果过滤芯的颜色是乳白色的，非常干净。说明过滤芯很有可能是被流动相污染了。 请检查一下您是否使用了过期的溶剂（水，有机溶剂），或质量不好的溶剂。请马上更换别的品牌的溶剂或使用纯净水（推荐：娃哈哈纯净水）。
如果流动相经过了滤膜过滤，请确认是否使用了正确的，的滤膜。建议您先不要使用滤膜过滤流动相，看看是否可以解决过滤芯堵塞的问题。
- 如果存放缓冲液或水的溶剂瓶不经常清洗，该通路会生长藻类，藻类会污染整个流路系统和脱气机的腔体，藻类及其代谢产物也会堵塞过滤芯。如果发生了这种情况，建议用60度的热水清洗溶剂瓶，并用异丙醇清洗整个管路和脱气机。建议以后一定要用棕色瓶存放缓冲溶液，避光，并且定期清洗溶剂瓶。
HPLC使用过程中常见问题及解决方法
2.峰面积或峰高重现性不好，偏差大
如果HPLC系统配有自动进样器，这种情况主要是自动进样器的问题。
- 首先确认柱前压是稳定的，保留时间的重现性好（参见第1，2条）
- 将自动进样器的抽样速度降低到50ul/min以下 （默认值是200ul/min）.您的样品有可能粘度较大，降低抽样速度可以极大地改善粘度较大的样品的进样精度。
- 如果进样针或针座有轻微的堵塞，对进样精度的影响也非常大。请参考第5条的处理办法。
- 如果是手动进样器，请确认一定要使用Agilent配的标准进样针，且进样器的废液出口要与进样口水平，避免虹吸的影响。如果是满Loop进样，建议注
射5倍Loop的进样体积。
HPLC使用过程中常见问题及解决方法