【中文名称】:蓝耳病检测试剂盒
【产品规格】:96T/48T。
【保存条件】:2-8℃低温保存
【保质期】:6个月,所有试剂盒均提供批次。
适用范围
用于检测猪血清中蓝耳病病毒特异性抗体,适用于猪场疫苗免疫效果评估、血清学流行病学调查及蓝耳病感染辅助诊断,对经典株和高致病性蓝耳病病毒抗体均有良好敏感性。
操作步骤
试剂准备
试剂盒提前从冷藏环境取出,室温平衡至少1小时,所有试剂充分摇匀后使用。
浓缩洗涤液用蒸馏水/去离子水按1:10比例稀释(如50mL浓缩液+450mL水),若有结晶可37℃水浴助溶。
样本稀释:待检血清用样本稀释液按1:40比例稀释(5μL血清+195μL稀释液),对照品无需稀释直接使用。
加样反应
设置空白对照1孔(加100μL样本稀释液)、阴性对照2孔、阳性对照2孔,其余为样本孔(加100μL稀释后血清)。
封板后37℃避光孵育30分钟,孵育建议使用水浴箱或湿盒,避免液体蒸发。
洗涤
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1分钟后甩干,重复洗涤4~6次,最后在吸水纸上拍干,避免残留液体。
使用洗板机时每孔注入350μL洗涤液,浸泡1分钟后洗涤,效果更稳定。
酶结合物孵育
除空白孔外,每孔加100μL酶结合物,封板后37℃避光孵育30分钟。
重复步骤3的洗涤操作。
显色与终止
每孔加100μL TMB底物液,轻轻振荡混匀,37℃避光显色10分钟,此时阳性孔会逐渐变为蓝色。
每孔加50μL终止液,溶液由蓝色变为黄色,终止反应后10分钟内完成读数。
读数
酶标仪以空白孔调零,检测450nm波长处各孔OD值(推荐用630nm作为参比波长,减少板底划痕干扰)。
通用注意事项
ELISA试剂盒所有试剂需平衡至室温后使用,未用完的板条立即放回自封袋密封,2~8℃干燥保存,避免受潮。
荧光PCR实验需严格分区操作(试剂准备区、样本处理区、扩增区),各区域器具专用,避免交叉污染。
终止液和底物液对皮肤、黏膜有刺激性,操作时佩戴手套,若不慎接触立即用大量清水冲洗。
不同批号试剂盒组分不可混用,实验废弃物需按生物危险品规范处置。
本试剂盒仅用于科研和动物疫病诊断,不得用于人类临床检测。