利用离心柱内硅基质膜提取RNA，在反转录酶的作用下，以RNA为模板，以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链。在TaqDNA聚合酶的作用下，经高温变性、低温退火、中温延伸的循环，使特异DNA片段的拷贝数放大一倍。经过35次循环，最终使扩增DNA片段放大了数百万倍。将扩增DNA片段进行电泳，经染色后，在紫外灯照射下，肉眼可见到DNA片段的扩增带。
探针法荧光PCR检测试剂盒的样品处理：
1、适用标本类型：发病动物血液、空肠及小肠肠内容物及组织脏器(肠道组织、肠系膜及淋巴结等)和病毒培养液。
2、标本采集，方法如下：
(1)血清：用一次性注射器取静脉血2-3ml，转至5ml的干燥管中，密闭送检。
(2)肠内容物：无菌条件下取肠道内容物约1g左右，置入1ml含有1.0mlPBS(或生理盐水)的5ml离心管中，立即送检。
(3)组织脏器：取发病动物肠道组织及肠系膜淋巴结等组织约1g，置一1.5ml的洁净离心管中，密闭送检。
3、应避免标本间交叉污染。
4、标本收集后可立即检测；若不能立即检测，可置于2～8℃冷藏过夜保存；如需长期保存，标本应冻存于-80℃以下，避免反复冻融。
