PCR核酸检测试剂盒
  定量PCR试剂盒
  ELISA试剂盒
  elisa检测试剂盒
  细胞
  生化试剂
  标准品对照品
  科研抗体
  科研细胞株
  生物耗材
  生物培养基
  生化检测试剂盒
  生物耗材、仪器
  免疫组化试剂盒
  BD耗材
  分子生物学试剂盒
  放免试剂盒
  金标法检测试剂盒
  食品检测试剂盒
  Western Blot
  微囊藻毒素
  fbs 胎牛血清
  免费代测ELISA服务
  TSZ elisa试剂盒
  RD elisa试剂盒
  IBL elisa试剂盒
  日本WAKO和光纯药
  *原时间试剂
  免疫组化代测服务
  质粒
  PCR试剂盒
  生化试剂盒
  试剂盒
  蛋白质生物学
  对照品
  生理生化检测试剂盒
  细胞培养
 
 
Anti-Caspase-0 半胱胺酸蛋白酶-0抗体试验操作方法

点击次数:1252 更新时间:2022-03-22
 

Anti-Caspase-0 半胱胺酸蛋白酶-0抗体试验操作方法:

蛋白提样品制备

1、 将培养液吸入至15 ml离心管中,于2500 rpm离心5 min。

2、 弃上清,加入5 ml PBS并用枪轻轻吹打洗涤,然后2500 rpm离心5 min。弃上清后用PBS重复洗涤一次。

3、 用枪吸干上清后,加100 μl裂解液(含PMSF)冰上裂解30 min,裂解过程中要经常弹一弹以使细胞充分裂解。

4、将裂解液4℃、12000 rpm离心5 min,取上清分装于0.5 ml EP管中并置于-20℃保存。

5、BCA法测蛋白浓度

SDS-PAGE电泳

1、 玻璃板对齐后放入夹中卡紧,然后垂直卡在架子上准备灌胶。

2、按前面方法配10%分离胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。灌胶时,可用10 ml枪吸取5 ml胶沿玻璃放出,待胶面升到绿带中间线高度时即可。然后胶上加一层水,液封后的胶凝的更快。(灌胶时开始可快一些,胶面快到所需高度时要放慢速度。操作时胶一定要沿玻璃板流下,这样胶中才不会有气泡。加水液封时要慢,否则胶会被冲变型。)

3、 当水和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝了。再等3 min使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干。

4、 按方法配4%的浓缩胶,加入TEMED后立即摇匀即可灌胶。将剩余空间灌满浓缩胶后将梳子插入孔槽。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。待到浓缩胶凝固后,两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。

5、 用水冲洗浓缩胶,将其放入电泳槽中。

6、 测完蛋白含量后,计算含20-50 μg蛋白(根据自己的实验需要进行选择,没有固定的量)的溶液体积即为上样量。取出上样样品至200 μl的EP管中,加入5×SDS 上样缓冲液至终浓度为1×。上样前要将样品于沸水中煮5-10 min使蛋白变性。

7、 加入足够的电泳缓冲液后开始准备上样。(电泳液至少要漫过内测的小玻璃板。)用微量进样器贴壁吸取样品,将样品吸出不要吸进气泡。将加样器针头插至加样孔中缓慢加入样品(包括一孔做可视的蛋白marker)。(加样太快可使样品冲出加样孔,若有气泡也可能使样品溢出。加入下一个样品时,进样器需在外槽电泳缓冲液中洗涤数次,以免交叉污染)

8、电泳:浓缩胶时用80-100 V跑,到分离胶以后用150-200 V跑,总时间2 h左右,电泳至溴酚兰刚跑出即可终止电泳,进行转膜。

丙型肝炎病毒抗体快速检测试剂国家参考品

风疹病毒IgG抗体参考品

风疹病毒IgM抗体参考品

紫堇块茎碱;Corytuberine

紫菫定酚;Corydine

正十二烷酸巨大戟酯;Dodecanoic

泽兰黄酮;6-Methoxyluteol

紫罗兰酮;Ionone

支脱皂苷元;Gitogenin

泽泻醇C-23-醋酸酯;Alisol C

泽泻醇A-24-醋酸酯;Alisol A

棕榈酸甲酯;Methyl hexadec

左旋千金藤啶碱;L-Stepholidi

棕矢车菊素;Jaceosidin

紫苏醇;Perillyl Alcohol

竹红菌乙素;Hypocrellin B

竹红菌甲素;hypocrellin A

紫萁酮;Osmundacetone

藏红花酸;Potassium 7-Hyd

cis-紫茎女贞苷B ;cis- Lig

紫茎女贞苷D ;Ligupurpuros

紫茎女贞苷C;Ligupurpurosi

紫茎女贞苷B;Ligupurpurosi

紫茎女贞苷A ;Ligupurpuros

左旋肉碱; L(-)-Carnitine

泽泻醇 B;Alisol B

泽泻醇 A;Alisol A

正丁胺; Butylamine

紫檀芪;Pterostilbene

竹节参皂苷IVa;Chikusetsu


 
上海研生生化试剂有限公司 版权所有 总访问量:880900 地址:上海市嘉定区澄浏公路52号
电话:021-59989018 手机:15201736385 联系人:王小姐 邮箱:3004965319@qq.com
GoogleSitemap ICP备案号:沪ICP备11012944号-8

智能制造网

推荐收藏该企业网站