日本血吸虫(SJ)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。
细胞衰老相关蛋白ASF1A抗体
氨基糖苷类磷酸结构域蛋白抗体
唾液酸糖蛋白受体1抗体
芳香基硫酸酯酶F抗体
A激酶锚定蛋白5抗体
小脑脊髓共济失调蛋白3抗体
ASTE1蛋白抗体
磷酸化自噬相关蛋白4B抗体
微丝相关蛋白1抗体
腺苷A1A受体抗体
芳基硫酸酯酶B抗体
γ氨基丁酸转氨酶抗体
共济失调蛋白2结合蛋白1抗体
坏死因子α转换酶
芳香烃受体核转录蛋白2抗体
AlkB同源蛋白8抗体
ABI基因家族成员3结合蛋白抗体
Rho GTP酶激活蛋白20抗体
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
乙醛脱氢酶1蛋白家族L1抗体
轴抑制蛋白2抗体
血管生成素相关蛋白6抗体
Muellerian缪勒管激素抑制因子抗体