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人窖蛋白(Cav-1)免疫组化试剂盒​实验步骤

点击次数:848 更新时间:2021-12-29
 

人窖蛋白(Cav-1)免疫组化试剂盒实验步骤(建议方案):


1.烤片: 将待做切片置于切片架上,于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr;


2.脱蜡: 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3 次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min;


3.水化: 切片经下行酒精水化,无水乙醇5min,95%乙醇2 次(每次2min),85%

乙醇2 min;75%乙醇2min,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min;


4.抗原修复: 根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复,常采用高压、微波(温度达到98~100℃)或酶消化修复法,室温自然冷却,自来水冲洗,ddH2O 洗2×2min,TBS 洗涤(2×2min)(具体修复方法见附1)* 注:有些抗原勿需修复,直接进入第5 步封闭。


5.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育30 min;


6.加一抗:滴加用试剂C(即用型一抗),37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜;


7.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);


8.封闭: 滴加试剂B,37℃湿盒孵育10 min;


9.加二抗: 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗(试剂D),37℃湿盒中孵育30 min;


10.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min);


11.封闭: 滴加试剂Tween 20,37℃湿盒孵育封闭20 min;


12.加HRP-SA: 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E(1:50~200,终浓度5~20 nM),37℃湿盒中孵育30 min;


13.洗涤: TBS-T 洗涤(3×5 min),TBS 洗涤(2×5 min);


14.显色:应用DAB 溶液(试剂F)显色;


15.复染:自来水充分冲洗,复染,脱水,透明;


16.封片: 待组织标本干后,用试剂缓冲甘油封固剂封片;


17.观察成像: 显微镜下观察成像。

(2NP-AMOZ)呋喃它酮代谢物单克隆抗体

(2NP-SEM)呋喃西林酮代谢物单克隆抗体

(2NP-AHD)呋喃妥因代谢物单克隆抗体

孔雀石绿单克隆抗体

氯霉素单克隆抗体

氟喹诺酮类药单克隆抗体

恩诺沙星单克隆抗体

环丙沙星单克隆抗体

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氟甲喹单克隆抗体

磺胺类药物单克隆抗体

磺胺嘧啶单克隆抗体

磺胺二甲基嘧啶单克隆抗体

磺胺二甲氧嘧啶单克隆抗体

磺胺喹噁啉单克隆抗体

磺胺对甲氧嘧啶单克隆抗体

链霉素单克隆抗体

四环素单克隆抗体

金霉素单克隆抗体

土霉素单克隆抗体

强力霉单克隆抗体

新霉素单克隆抗体

卡那霉素单克隆抗体


 
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