人CD44变体6ELISA检测试剂盒洗涤方法：

1. 自动洗板机：每孔加入洗涤液350μl，注入与吸出间隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干，每孔加洗涤液350μl，浸泡1-2分钟，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体，在厚的吸水纸上拍干。洗板5次。

实验开始前，各试剂均应平衡至室温；试剂或样品配制时，均需充分混匀，并尽量避免起泡。

1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。给酶标板覆膜，37℃孵育2小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.弃去液体，甩干，每个孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分钟内配制)，酶标板加上覆膜，37℃温育1小时。

3.弃去孔内液体，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分钟，大约350μl /每孔，甩干并在吸水纸上轻拍将孔内液体拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(临用前15分钟内配制)100μl，加上覆膜，37℃温育1小时。

5.弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。

6.每孔加底物溶液100μl，酶标板加上覆膜37℃避光孵育15分钟左右(根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过30分钟。当标准孔出现明显梯度时，即可终止)。

7.每孔加终止液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(OD值)。应提前打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。

9.实验完毕后将未用完的试剂按规定的保存温度放回冰箱保存至有效

人结直肠腺癌细胞；HT-29

人巨细胞白血病细胞株；Mo7e

人非小细胞肺腺癌细胞；NCI-H157

人前列腺癌细胞；PC-3 [PC3]

人红系白血病细胞；TF-1

人乳腺导管瘤细胞；UACC812

人类原巨核细胞型白血病细胞；UT-7

人恶性黑色素瘤细胞；A-375 [A375]

人乳腺导管瘤细胞；BT-474

人结直肠腺癌细胞；COLO 205

人结直肠腺癌细胞；COLO 320DM [COLO320DM]

人Burkkit淋巴瘤细胞；Daudi

人十二脂肠腺癌；HuTu-80

人鼻咽癌细胞；CNE-2Z

人胎盘绒膜癌细胞；BeWo

人结直肠腺癌细胞；HCT 116 [HCT116]

人T淋巴瘤转基因细胞；Jurkat D,E

人T淋巴瘤细胞Jurkat亚系；Jurkat77

人口腔表皮样癌细胞；KB

人结直肠腺癌细胞；LoVo

人结直肠腺癌细胞；SW480 [SW 480；SW-480]

急性T淋巴细胞白血病细胞；TALL-104

人肾癌细胞；A498

人宫颈癌细胞；C-33A

人宫颈癌细胞；Hela 229 [HeLa229]

人宫颈癌细胞；Hela P10s-11F

人宫颈癌细胞；Hela S3 [HeLaS3]

人胰腺腺泡上皮癌；HPAC

人T淋巴细胞白血病细胞；HuT 78

人肺鳞癌细胞；NCI-H520

人前列腺癌高转移细胞株；PC-3M IE8

人前列腺癌低转移细胞株；PC-3M-2B4

人肺巨细胞癌高转移细胞株；PG-BE1

人肺巨细胞癌低转移细胞株；PG-LH7

人结直肠腺癌细胞；SW620 [SW 620；SW-620]

人脑星形胶质母细胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG]

人肺癌细胞；A-427 [A427]

人胰腺癌细胞；AsPC-1

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；C918

人髓母细胞瘤细胞；Daoy

人乳腺导管癌细胞；HCC38

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；M619

人胃癌细胞；MGC-803

绿色荧光蛋白标记人胃癌细胞；MGC803-GFP

人胃癌细胞；MKN-45

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；MuM-2B