目前主流的实时荧光定量RT-PCR法(QuantitativeReal-timePCR)分为染料法和探针法，染料法以SYBRGreen法为代表，SYBRGreen染料游离时荧光微弱，但但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强，反应管中的荧光强度与反应管中双链DNA的数量成正比例关系，因此可以通过检测荧光计算反应管中产生的双链DNA(PCR产物)的量，但该方法没有特异性，非特异性扩增的产物也会被计入。对于探针法来说，反应管中的荧光强度也是检测PCR产物量的依据。但其发光机制却与染料法*不同。
 

　　SYBRGreen检测模式是一种能与双链DNA结合发光的荧光大增强。因此，SYBRGreen的检测出PCR体系存在的双链DNA数量。由于SYBRGreen没有特异性，不能识别特定的双链，只要是双链就会结合发光，对PCR反应中的非特异性扩增或引物二聚体也会产生荧光，所以在临床上使用可能会有假阳性发生。SYBRGreen的优点是因为其缺点产生，由于它能所有的双链DNA相结合，所以对不同模板不需特别定制不同的，这对科研是很有利的。
 

　　RT-PCR法的技术原理是采用双重PCR技术和Taqman探针技术相结合，针对样品的特异性序列设计引物和探针，通过监测不同荧光通道的荧光信号变化，检测MTB感染。该技术具有特异性强、灵敏度高、简便易行等优点。大量研究显示，RT-PCR技术在标本快速诊断中具有重要的临床价值。
 

　　关于RT-PCR法的两种荧光定量检测就是就到这里了，希望看完这篇文章能对你有所帮助！