乙醛脱氢酶(ALDH)样本的前处理:
组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g,4℃离心5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11100g,4℃离心10min。
④ 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的 NOX(此步可选做)。
⑤ 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10秒,重复30次),用于NOX活性测定。
血清(浆)样品:直接检测。
1,2,3,5-Tetra-O-Acetyl-β-L-
Ribofuranose
1-HeptanesulfonateSodium
(庚烷磺酸钠)
1-HexanesulfonicAcidSodiumSalt
(己烷磺酸钠)
1-OctanesulfonicacidSodiumsalt
(辛烷磺酸钠)
2,3,5-Tri-O-Benzoyl-1-O-
Acetyl-D-Ribofuranose
2,4-D
(2,4-二氯苯氧乙酸)
2,6-Dichlorophenolindophenol,
(氯靛酚钠)
2’-Deoxy-D-Glucose
(2-脱氧-D-葡萄糖)
2’-Deoxy-D-Ribose
(2-脱氧-D-核糖)
20XSSC溶液
(20XSSC溶液)
2-Thiobarbituricacid
(2-硫代巴比妥酸)
3#Bilesalt
(三号胆盐)
3-AT
4-Chloro-1-Naphthol
(4-氯-1-萘酚)
4-Methylumbelliferone
(4-甲基伞形酮)
5-Bromo-2'-Deoxyuridine