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| 札如病毒(SV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)血样收集方法 |
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| 点击次数:1555 更新时间:2020-10-27 |
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札如病毒(SV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)准备试剂与收集血样: 双重核酸试剂盒(荧光PCR法) 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。 2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。 3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水) 检测程序: 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。 3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。 4. 洗板:同前。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。 6. 洗板:同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。 8. 每孔加入100ul 终止液混匀。 9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。 本试剂盒用一对新城疫病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用一步法荧光RT-PCR技术对新城疫病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。 【储存条件】-20℃避光保存,避免反复冻融。 【试剂规格及有效期】48 T/盒,有效期12个月。说明:不同批号的试剂组分不可交互使用。 【适用仪器】取得资格认证的荧光定量PCR仪。 |
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