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人肿瘤坏死因子α高敏 ELISA 试剂盒实验的样品收集

点击次数:764 更新时间:2020-05-14
 
  人肿瘤坏死因子α高敏 ELISA 试剂盒实验样品收集:
 
  1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集 血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
 
  2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-Na2,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可 检测。避免使用溶血,高血脂样品。
 
  3.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
 
  4.其它生物样品:1000×g离心20分钟,取上清即可检测 具体处理方法可参考:
 
  5.样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。
 
  6.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会 影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体 积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。 推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组 织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟, 取上清检测。
 
  7.样品收集后若在1周内进行检测的可保存于4℃,若不能及时检测,请按一次使用量分装,冻 存于-20℃(1个月内检测),或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。
 
  8.如果您的样品中检测物浓度高于标准品zui高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先 做预实验,以确定稀释倍数)。
 
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