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耐药株细胞PCR检测试剂盒试剂准备

点击次数:346 更新时间:2020-04-09
 
  耐药株细胞PCR检测试剂盒试剂准备
 
  1. DNA模板
 
  2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
 
  3.10×PCR Buffer
 
  4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
 
  5.Taq酶
 
  注意事项
 
  1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个的PCR实验室。
 
  2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
 
  3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
 
  4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
 
  5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
 
  6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
 
  7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
 
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