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猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒组织结构

点击次数:814 更新时间:2019-07-17
 

猪血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒组织结构

1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心12分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心60分钟去除颗粒。

3、细胞上清液:1000×g离心32分钟去除颗粒和聚合物。

4、组织匀浆:将组织加入适量生li盐水捣碎。1000×g离心33分钟,取上清液。

5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

【技术原理】

1、抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

2、结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。

3、酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。

4、受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。

5、此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。

6、加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好,以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。

 
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