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ELISA试剂盒的选择

点击次数:790 更新时间:2016-11-03
 

ELISA试剂盒的选择

医药人员,尤其是各大医药公司的动物模型,临床实验的研究人员在实验设计中,需要选择一些有疾病代表性的Biomarker,比如在特定适应症的临床实验中的使用率,学术文章中的发表情况。如能有效掌握一些大数据,将给实验设计的合理性提供了保证。

*步:测什么Biomarker?
可以根据研究文献的数量和临床试验,比如TNF-a,在以下各大疾病的临床实验中,和对应文献中均有使用。当然在炎症,心血管疾病,糖尿病等疾病中的临床试验和使用zui多。
第二步:选什么试剂盒?
以TNF-a为例,Meso Scale Discovery® Vplex电化学发光试剂盒以0.04pg/mL的灵敏度是普通ELISA(7 pg/mL左右)的100多倍。如果实验样本中的TNF-a低于7pg/mL,这就意味着实验数据会无法检测,实验没有定量结论。另外一个案例,临床常规测定普通CRP的方法检测线性一般为3~200mg/L,而预测心血管事需要更高灵敏度的CRP,超敏或高敏CRP (hs-CRP)。
如需要检测的是尿液,柠檬酸盐血浆样本,需在订购前仔细查看Elisa试剂盒说明书中的验证样本。简单的说,如果ELISA试剂盒是没有用过试剂盒检测尿样,柠檬酸盐血浆,使用该试剂盒检测尿样会存在极大的风险;而且很多ELISA试剂盒中还会特别说明“不能检测柠檬酸盐血浆”。Vplex试剂盒验证过的样本有血清, EDTA血浆,肝素血浆,柠檬酸盐血浆,尿液,细胞上清液。
第三步:检测什么样本?试验周期多长?
如自己采购抗体,开发ELISA方法学,如遇到抗体亲和力低,由于ELISA的两次洗脱将可能将抗体洗掉,大大影响实验结果。Meso Scale Discovery® 可以不用洗,2.5小时完成实验的一步法。
如实验研究周期较长,ELISA试剂盒尽量选择一个批次的,以防止不同批次间的差异。然而由于普通ELISA有效期在3-12个月,而实验周期往往在1-2年以上,一些长期临床实验项目甚至在5-10年,因而经常面临不同批次的挑战。而Meso Scale Discovery®Vplex试剂盒经过54个月稳定性测试。使用Vplex,*可以用一个批次支持2-3年的实验。

 
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