非特异性背景染色的常见问题和解决办法
常见问题                                 解决办法
操作过程中漂洗不充分           每步步骤后冲洗3次，每次5分钟

加试剂后切片干燥               防止切片干燥

组织切片折叠                   勿取折叠处观察染色结果

组织中所含过氧化物酶未阻断     可再配制新鲜3％H20：封闭，孵育时间延长

组织中所含内源性生物素未封闭   使用阻断剂阻断内源性生物素

组织抗原 弥散                   组织及时固定，固定液要符合标准

切片黏附剂过厚                 重新配制黏附剂涂片

血清蛋白封闭不充分             延长血清蛋白封闭时间或再次用2％BSA封闭

染色过强
染色过强的常见问题和解决办法
    常见问题                                    解决办法
一抗浓度过高或抗体孵育时间过长          降低一抗浓度或缩短一抗孵育时间

孵育温度过高，超过37℃  蛋白                一般室温20～28℃

生物素化二抗或SABC-POD孵育时间过长      缩短孵育时间

DAB显色时间过长或DAB浓度过高           显色时间不能超过5―10分钟，以显微镜下观察为准