细胞培育是试验室里zui常见和zui基本的实验,但是不是zui简单的。别以为细胞培育是一件简单的事,这里也蕴藏着许多学问。有的时候细胞状况不好的话,会导致转染、药筛这些实验底子没办法做。影响细胞培育的因素有很多,我们先从培养基和血清开始说。
经典的细胞培养基有很多种,例如Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是运用zui广泛的。其他的例如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培育。
◆MEM是由Eagle’s基础培育基(BME)开展而来的,其间添加了成分的规格及浓度。
◆Dulbecco改进的BEM(DMEM)培养基是专为小鼠成纤维细胞准备的,常用于贴壁细胞的培育。DMEM中氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,选用双倍的HCO3-和CO2浓度可以起到十分好的缓冲效果。开端的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了满足某些细胞的成长需求,将葡萄糖含量调整为4500 mg/L,这就是我们常说的低糖和高糖了。
◆aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可以广泛用于各种细胞类型,包括对营养成分需求严苛的细胞。
◆Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而规划的,如今也广泛运用于克隆构成率的剖析及原代培育。F12还能够与DMEM等体积混合运用,得到一种高浓度与成分多元化相的产品,这种培养基已运用于许多原代培育及更难养的细胞系的培育。
◆RPMI 1640培养基是用于淋巴细胞培育的,如今已广泛用于悬浮细胞的培育。